丹贝益肺方对肺纤维化大鼠肺组织中MEK、ERK及其磷酸化水平的影响

来源 :黑龙江省中医药科学院 | 被引量 : 1次 | 上传用户:omlieo
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目的:本课题采用实验的方法通过博来霉素诱导致大鼠肺纤维化,观察经验方丹贝益肺方对该模型中肺纤维化大鼠的一般状态及肺组织形态的影响和对肺组织中MEK、ERK表达水平及其磷酸化水平的影响,证明丹贝益肺方在治疗疾病肺纤维化中对于一般临床表现的有效性及对肺组织中指标的影响。方法:选取SPF级Wistar大鼠90只,性别标准:雌雄各半,饲养要求:按照SPF级的标准进行适应性饲养1周,然后采用随机的方法将大鼠分为五组,分别为:正常空白对照组、模型对照组、泼尼松组、丹贝益肺方低剂量组、丹贝益肺方高剂量组,每组18只。按照完全随机的方法,将实验所用的大鼠依照文献中博莱霉素诱导造模的方法进行造模。大鼠造模成功后分别按照生理盐水,丹贝益肺水煎液0.3g/ml,丹贝益肺水煎液1.2g/ml,泼尼松溶液0.5mg/ml的标准进行灌胃,在造模成功后分别按不同的时间周期在第7、14、28天每次随机选取六只大鼠,先观察大鼠的一般状态的变化,然后处死大鼠,处死后迅速进行肺组织取材,先用肉眼观察每组大鼠的肺组织的外观的变化;再对肺组织处理行Masson染色的方法,然后在染色镜下观察肺的外观变化,并观察肺纤维化的程度,最后将肺组织制备成片,用SABC免疫组化法测定肺组织中MEK1/2、ERK1/2的水平,行Western blot法测定MEK、ERK的磷酸化水平。结果:丹贝益肺方高低剂量组及泼尼松组都能改善博莱霉素诱导肺纤维化大鼠的活动表现,用药组的大鼠一般情况均有所改善,程度不同,实验证实丹贝益肺方能够降低其肺组织中MEK1/2、ERK1/2及其磷酸化水平,染色镜下观察大鼠肺组织纤维化程度有所减轻。研究发现,丹贝益肺方可显著降低博莱霉素致大鼠的肺组织中MEK1/2、ERK1/2水平(P<0.01),与强的松组作用相似(P>0.05),丹贝益肺方高低剂量组之间的比较未见明显差异(P>0.05)。丹贝益肺方可显著降低博莱霉素致肺纤维化大鼠的肺组织p-MEK1/2、p-ERK1/2水平(P<0.01)。通过实验过程及所得结果表明,丹贝益肺方可以改善博莱霉素致大鼠肺纤维化的程度,减轻肺纤维化的临床症状,延缓肺纤维化进程;丹贝益肺方可以降低博莱霉素致肺纤维化大鼠的肺组织中MEK1/2、ERK1/2及其磷酸化水平。结论:1.经验方丹贝益肺方可降低肺纤维化大鼠的肺组织中MEK1/2、ERK1/2的水平以及其磷酸化水平的表达。2.丹贝益肺方能减缓肺纤维化进程的进展。
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