糯性小麦因籽粒中直链淀粉含量较低,在食品工业和其他方面有着非常大的应用前景。小麦糯性基因Waxy控制籽粒中直链淀粉的合成,其功能丧失型突变体会使籽粒的直链淀粉含量下降,从而使小麦糯性增强。如果小麦籽粒中直链淀粉含量趋近于0,则称为全糯质小麦。然而,至今在自然界中仍未发现天然的全糯质小麦,需要通过人工创制。传统的小麦品质改良方法存在不定向、效率低和工作量大等缺点。利用CRISPR/Cas9技术可以获取对Waxy基因进行高效突变的转基因小麦,并且能够通过遗传分离方法获得不含转基因元件的突变植株,同时突变可以在下一代中稳定的遗传,有望成为安全高效改良小麦品质的新途径。本研究利用CRISPR/Cas9技术对普通小麦Fielder的糯性基因Waxy进行了初步的定点编辑尝试,主要研究结果如下:1.Fielder小麦经分子标记和SDS-PAGE鉴定发现只含有Wx-7A和Wx-7D基因,天然缺失Wx-4A基因。2.针对Fielder小麦的Waxy基因构建了三靶点编辑载体p Ta Cas9-Ta U3-TG1/2/3,经农杆菌转化Fielder小麦幼胚,最终筛选得到3株T0代突变小麦,T0代转基因阳性小麦突变效率为17.6%。3.3株T0代突变小麦的Waxy基因有杂合突变和双等位突变两种基因型,靶点的突变形式为6bp以内碱基缺失和单碱基A的插入,靶点TG1处的碱基缺失均造成了Waxy基因起始密码子的不完整,成功对小麦Waxy基因进行了定点编辑。