前言:恶性肿瘤是一类严重危害人类健康的疾病。尽管随着恶性肿瘤发病机制的逐步阐明,越来越多的治疗手段和治疗靶点被应用到临床,但是恶性肿瘤总的治疗效果还是差强人意,5年总生存率不足20%。而且存在单一用药效果差,疗效不持久,单一分子靶向治疗存在脱靶效应等缺点,临床上亟需开发新的治疗方法,尤其是联合用药的治疗方案。溶瘤病毒(OVs)于上个世纪中期首次被报道,是一类自然存在的或人工编辑的病毒,对肿瘤细胞能特异性杀伤。我校特聘教授刘滨磊自主研发的溶瘤病毒oHSV2就是这样一种OVs。临床前研究表明,oHSV2能特异性地杀灭几乎所有肿瘤细胞,有望成为一种广谱抗癌药物,但是对于其联合用药方案目前研究较少。氯丙嗪是第一代吩噻嗪类抗精神病药物,是一种多巴胺受体阻断剂。本课题旨在探讨II型单纯疱疹溶瘤病毒oHSV2联合多巴胺受体阻滞剂氯丙嗪作用恶性胶质瘤细胞U251的体外协同效应,并探讨其可能的作用机制,为联合应用这两种药物治疗恶性胶质瘤提供前期实验依据。目的:研究oHSV2联合氯丙嗪对恶性胶质瘤细胞株U251恶性生物学行为的抑制作用。方法:1、采用MTT法测定oHSV2、氯丙嗪单独应用及二者联合应用时对恶性胶质瘤细胞株U251增殖能力的抑制作用。2、平板克隆形成实验检测oHSV2、氯丙嗪单独应用及二者联合应用时对恶性胶质瘤细胞株U251离体克隆形成能力的影响。3、Transwell小室实验检测oHSV2、氯丙嗪单独应用及二者联合应用时对恶性胶质瘤细胞株U251侵袭、迁移能力的影响。4、依据Chou-Talalay中效原理,以联合给药分析软件CalcuSyn 2.1计算协同作用指数(CI)值,评价联合作用效果。结果:1、MTT实验结果显示oHSV2、氯丙嗪单药对恶性胶质瘤细胞株U251的抑制作用具有浓度依赖性。二者联合作用72 h后,增殖抑制率明显升高,抑制作用显著增强。应用CalcuSyn 2.1软件分析协同效果,二者在很大范围内具有协同增强作用。2、平板克隆形成实验显示oHSV2、氯丙嗪单药都能降低恶性胶质瘤细胞株U251的离体克隆形成能力,而联合用药显著降低恶性胶质瘤细胞株U251的离体克隆形成能力,两者有协同增强作用。3、Transwell小室迁移和侵袭实验显示oHSV2、氯丙嗪单药都能降低恶性胶质瘤细胞株U251的侵袭和迁移能力,而联合用药显著降低恶性胶质瘤细胞株U251的侵袭和迁移能力,两者有协同增强作用。结论:oHSV2和氯丙嗪联合给药对恶性胶质瘤细胞株U251的恶性生物学行为有协同抑制作用。