中国明对虾双功能分子β-1,3-葡聚糖结合蛋白-脂蛋白的研究

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本文首次研究了中国明对虾βGBP-HDL基因的相关内容,对理解βGBP-HDL的发生、作用和调控机制,提高营养利用率,研究对虾病害防治有重要的理论意义。通过同源克隆方法,成功的克隆出中国明对虾βGBP-HDL部分cDNA序列,发现与凡纳滨对虾的βGBP-HDL cDNA序列有高达93%的同源性。运用RT-PCR方法对中国明对虾βGBP-HDL的组织表达和发育阶段的表达情况进行了研究,结果表明:中国明对虾的βGBP-HDL在肝胰腺、血细胞和肠中表达,且在肝胰腺中的合成量最高;此种蛋白在中国明对虾的整个发育时期都有表达,证实中国明对虾βGBP-HDL基因为组成型。利用半定量RT-PCR法对中国明对虾βGBP-HDL的营养相关作用进行了研究,发现在饲喂后2h,此蛋白基因表达量达到最高,24h达到最低,48h、72h、120h都有小幅度增加,并且,高脂饲料饲喂组βGBP-HDL相对表达量比对照组稍高,验证了中国明对虾βGBP-HDL参与对虾体内脂质运输。利用荧光定量PCR研究了白斑病毒刺激后中国明对虾βGBP-HDL表达差异,结果发现,刺激后蛋白相对表达量升高,6h时达到最高(P<0.01),之后又下降。表明βGBP-HDL参与了由病毒刺激引发的免疫级联反应,在防御病毒感染中发挥一定作用。
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