【摘 要】
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隐孢子虫、毕氏肠微孢子虫和十二指肠贾第虫是3种常见感染人和动物的肠道原虫,世界范围内广泛流行。前期调查显示,不同国家和地区宠物犬3种肠道原虫的感染率存在较大差异,其遗传特征也存在多样遗传分布特点。本研究以新疆部分地区宠物犬为调查对象,采用分子生物学方法检测其3种肠道原虫的感染情况,解析其种类/基因型分布特征。（1）基于隐孢子虫SSU rRNA基因位点,采用PCR法对新疆5个地区604份宠物犬粪便样
【基金项目】
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“新疆生产建设兵团中青年领导科学技术创新项目”（项目编号:2018CB034）课题主持人:齐萌副教授（塔里木大学）
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隐孢子虫、毕氏肠微孢子虫和十二指肠贾第虫是3种常见感染人和动物的肠道原虫,世界范围内广泛流行。前期调查显示,不同国家和地区宠物犬3种肠道原虫的感染率存在较大差异,其遗传特征也存在多样遗传分布特点。本研究以新疆部分地区宠物犬为调查对象,采用分子生物学方法检测其3种肠道原虫的感染情况,解析其种类/基因型分布特征。（1）基于隐孢子虫SSU rRNA基因位点,采用PCR法对新疆5个地区604份宠物犬粪便样本DNA进行检测。结果检测出10份隐孢子虫阳性样本,感染率为1.7%（10/604）,以石河子市宠物犬的隐孢子虫感染率最高,为9.8%（4/41）,不同地区宠物犬隐孢子虫感染率统计学差异极显著（P＜0.01）;＜1岁和≥1岁宠物犬的隐孢子虫感染率分别为2.0%（9/459）和0.7%（1/145）,不同年龄宠物犬隐孢子虫感染率无统计学差异（P＞0.05）;宠物犬舍、宠物店和宠物医院宠物犬的隐孢子虫感染率分别为1.9%（5/214）、1.6%（4/256）和1.5%（2/134）,不同样本来源宠物犬隐孢子虫感染率无统计学差异（P＞0.05）;雄犬和雌犬的隐孢子虫感染率分别为2.2%（6/278）和1.2%（4/326）,不同性别宠物犬隐孢子虫感染率无统计学差异（P＞0.05）。10份隐孢子虫样本经序列分析比对,均鉴定为犬隐孢子虫。结果提示新疆部分地区宠物犬隐孢子虫感染率较低,且具有宿主特异性。（2）基于毕氏肠微孢子虫核糖体DNA内部转录间隔区（ITS）,采用PCR法对宠物犬粪便样本DNA进行检测。结果发现宠物犬毕氏肠微孢子虫感染率为6.3%（38/604）,以阿克苏市和石河子市宠物犬毕氏肠微孢子虫感染率较高,分别为13.6%（2/22）和12.2%（5/41）,不同地区宠物犬毕氏肠微孢子虫感染率统计学差异显著（P＜0.05）;＜1岁和≥1岁宠物犬的毕氏肠微孢子虫感染率分别为5.0%（23/10）和10.3%（15/145）,不同年龄宠物犬隐孢子虫感染率统计学差异显著（P＜0.05）;宠物犬舍、宠物店和宠物医院宠物犬的毕氏肠微孢子虫感染率分别为1.9%（5/214）、1.6%（4/256）和1.5%（2/134）,不同样本来源宠物犬隐孢子虫感染率无统计学差异（P＞0.05）;雄犬和雌犬的毕氏肠微孢子虫感染率分别为2.2%（6/278）和1.2%（4/326）,不同性别宠物犬隐孢子虫感染率无统计学差异（P＞0.05）。38份毕氏肠微孢子虫样本经序列分析比对,鉴定出8个基因型,包括5个已知基因型（Pt Eb IX、Ebp C、D、CD9和Type IV）和3个新基因型（CD11、CD12、CD13）,以基因型Pt Eb IX为优势基因型（50.0%,19/38）。系统发育分析显示,6个基因型归类于群组1,2个基因型归类于群组11。结果提示新疆部分地区宠物犬毕氏肠微孢子虫存在基因型多样分布特点。（3）基于十二指肠贾第虫SSU rRNA基因位点,采用PCR法对宠物犬粪便样本DNA进行检测。结果发现宠物犬十二指肠贾第虫感染率为3.6%（22/604）,以和田宠物犬的十二指肠贾第虫感染率为最高,为7.5%（16/213）,不同地区宠物犬十二指肠贾第虫感染率无统计学差异（P＞0.05）;＜1岁和≥1岁宠物犬的十二指肠贾第虫感染率分别为4.1%（19/459）和2.1%（3/145）,不同年龄宠物犬隐孢子虫感染率无统计学差异;宠物犬舍、宠物店和宠物医院宠物犬的十二指肠贾第虫感染率分别为0.5%（1/214）、5.9%（15/256）和1.5%（2/134）,不同样本来源宠物犬隐孢子虫感染率无统计学差异（P＞0.05）;雄犬和雌犬的十二指肠贾第虫感染率分别为2.9%（8/278）和4.3%（14/326）,不同性别宠物犬隐孢子虫感染率无统计学差异（P＞0.05）。22份十二指肠贾第虫样本经序列比对,鉴定出3种十二指肠贾第虫集聚体,分别为集聚体C（n=14）、集聚体D（n=7）和集聚体A（n=1）。结果提示,新疆部分地区宠物犬十二指肠贾第虫人兽共患风险较低。综上所述,本研究发现新疆部分地区宠物犬隐孢子虫、毕氏肠微孢子虫和十二指肠贾第虫感染率均较低,其感染的隐孢子虫种类和十二指肠贾第虫集聚体均具有宿主特异性,感染的毕氏肠微孢子虫存在基因型多样分布特点。研究结果为我国宠物犬肠道病原的感染情况调查和遗传分布特征研究提供了基础资料。
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