【摘 要】
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头孢菌素类抗生素疗效好、毒性低、耐β-内酰胺酶、过敏反应较少、抗菌谱广。目前已有60多种头孢菌素类抗生素,使用量超过抗生素总用量的50%。中国是世界上生产头孢菌素原料
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头孢菌素类抗生素疗效好、毒性低、耐β-内酰胺酶、过敏反应较少、抗菌谱广。目前已有60多种头孢菌素类抗生素,使用量超过抗生素总用量的50%。中国是世界上生产头孢菌素原料的主要国家,国内外生产企业竞争激烈。头孢菌素C原料成本不断提高,国家严格限制在临床使用抗生素,因此企业寻求更优质的菌种与生产工艺。本文的研究对象为头孢菌素C产生菌顶头孢霉菌,选择推理选育方法筛选顶头孢霉菌获得高产菌株。然后,研究头孢菌素C发酵培养基及其发酵过程,以改善顶头孢霉的发酵单位,降低头孢菌素C的生产成本。主要研究结果如下:以HX-5为出发菌株对顶头孢霉进行推理选育,确定了铜离子、丙二酸、头孢菌素C钠盐三种筛选压力的筛选浓度,最终筛选出高产菌株HT-103、HB-085、HC-008,效价分别较原始出发菌株提高11.2%、6.0%、20.8%。对发酵培养基进行优化,确定了培养基最佳浓度,豆油为60 g·L-1,玉米浆为60 g·L-1,蛋氨酸为6 g·L-1,KH2PO4为7 g·L-1,Fe2+为0.3 g·L-1,Zn SO4为0.02 g·L-1,Mn SO4为0.01 g·L-1,Cu SO4为0.02 g·L-1。以50%油酸甲酯替代豆油,以5 g·L-1豆粕粉替代10 g·L-1玉米浆,头孢菌素C的产量较高。对发酵工艺进行优化,确定了灭菌前的p H值7.2-7.6范围内,最佳装料量为2.6 L,接种量20%,最佳变温时间为40 h。改进了补料工艺,选择葡萄糖和豆油的混合碳源进行DO-Stat补料,头孢菌素C的产量和得率都有明显的提高。优化后的头孢菌素C效价提高了10%左右。
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