骨髓腔补液对感染性休克小鼠免疫功能的影响

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目的观察骨髓腔补液对脓毒症小鼠生存率、骨髓细胞和肝脏细胞数量、骨髓和肝脏中调节树突状细胞(CD11clowCD45RBhigh DCs)的数量和比例的影响,探讨CD11clowCD45RBhigh DCs与脓毒症小鼠免疫功能的关系和对脓毒症小鼠预后的影响。方法1骨髓腔补液对脓毒症小鼠骨髓细胞和肝脏细胞数量的影响以及对脓毒症小鼠生存率的影响:30只健康的雄性C57BL/6小鼠(6~8w),体重20±1g,随机分成三组,每组10只,对照组(A0组),25μL/g液体复苏组(A1组),50μL/g液体复苏组(A2组)。A0组仅建立骨髓腔补液模型不注射液体,随后腹腔注射致死菌,A1、A2组在骨髓腔补液模型建立后分别给予无菌生理盐水25μL/g,50μL/g。随后,单次腹腔注射致死菌制作脓毒症模型。操作结束放回笼中,自由进食水,观察术后7d小鼠的存活率。30只健康的雄性C57BL/6小鼠随机分成三组:A0,A1,A2,三组操作与上述观察生存率实验相同。分别于0d、3d、5d、7d检测各组小鼠骨髓细胞和肝脏细胞以及骨髓细胞和肝脏细胞中CD11clowCD45RBhigh DCs的数量和比例。2观察回输骨髓细胞和肝脏细胞以及骨髓细胞和肝脏细胞中CD11clowCD45RBhigh DCs对脓毒症小鼠预后的影响:90只健康的雄性C57BL/6小鼠(6-8w),体重20±1g,随机分成九组,每组10只,对照组(C组),回输骨髓细胞数量5×106组(B1组),回输骨髓细胞数量107组(B2组),回输肝脏细胞数量5×106组(L1组),回输肝脏细胞数量107组(L2组),回输骨髓细胞中的CD11clowCD45RBhigh DCs数量5×105组(BD1组),回输骨髓细胞中的CD11clowCD45RBhigh DCs数量106组(BD2组),回输骨肝脏细胞中的CD11clowCD45RBhigh DCs数量5×105组(LD1组),回输肝脏细胞中的CD11clowCD45RBhigh DCs数量106组(LD2组)。C组腹腔注射等量的无菌生理盐水,其余各组腹腔注射含有上述不同细胞数的等量无菌生理盐水。观察各组脓毒症小鼠的生存率。结果1骨髓腔补液对脓毒症小鼠生存率的影响:三组小鼠均有饮水差,食欲欠佳,眼角分泌物增多等现象。A0组小鼠生存率0%、A1组小鼠生存率50%、A2组小鼠生存率70%。与A0组比较,A1、A2组脓毒症小鼠的生存率明显提高(P<0.05);与A1组比较,A2组脓毒症小鼠的生存率明显提高(P<0.05)。2骨髓细胞和肝脏细胞数量变化:与A0组相比较,A1、A2组骨髓细胞和肝脏细胞的数量均有所增加(P<0.05);与A1组相比,A2组骨髓细胞和肝脏细胞的数量均有所增加(P<0.05)。3骨髓和肝脏中CD11clowCD45RBhigh DCs数量的变化:与A0组相比较,A1、A2组CD11clowCD45RBhigh DCs的数量明显增加(P<0.05);与A1组比较,A2组CD11clowCD45RBhigh DCs的数量明显增加(P<0.05)。4骨髓和肝脏中CD11clowCD45RBhigh DCs占DCs比例变化:与A0组相比较,A1、A2组CD11clowCD45RBhigh DCs占DCs比例明显增加(P<0.05);与A1组比较,A2组CD11clowCD45RBhigh DCs占DCs比例明显增加(P<0.05)。5细胞回输对脓毒症小鼠生存率的影响:1)与C组相比,回输骨髓细胞和肝脏细胞可以降低脓毒症小鼠的死亡率,但差异不具有统计学意义(P>0.05)。2)回输骨髓中的CD11clowCD45RBhigh DCs:与C组比较,BD1、BD2组脓毒症小鼠的生存率明显提高(P<0.05);与BD1组比较,BD2组脓毒症小鼠的生存率明显提高(P<0.05)。3)回输肝脏中的CD11clowCD45RBhigh DCs:与C组比较,LD1、LD2组脓毒症小鼠的生存率明显提高(P<0.05);与LD1相比,LD2组脓毒症小鼠的生存率明显提高(P<0.05)。结论1骨髓腔补液能够增加脓毒症小鼠骨髓细胞和肝脏细胞数量,增加脓毒症小鼠的生存率。2骨髓腔补液能够增加脓毒症小鼠骨髓细胞和肝脏细胞中CD11clowCD45RBhigh DCs的数量和比例,增加脓毒症小鼠的生存率。3CD11clowCD45RBhigh DCs的数量影响脓毒症小鼠的免疫功能,逆转脓毒症小鼠晚期免疫麻痹,提高生存率。图12幅;表2个;参157篇。
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