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瘤背石磺是一种具有较高经济价值、药用价值和生态价值的无壳贝类,当前由于环境污染已处于濒临灭绝状态,盐度是影响其生长代谢的重要因素。本试验以瘤背石磺为研究对象,通过在不同盐度(5、15、25、35和45)环境下饲养,研究盐度对瘤背石磺体组成、血液生化指标和免疫指标、消化系统的组织学和超微结构、消化酶类的种类分布和酶活变化、对不同饲料原料的表观消化率以及渗透调节的影响,初步探索了瘤背石磺的渗透压调节机制,为瘤背石磺的繁育、养殖和基础研究提供参考。1盐度对瘤背石磺生长和肌肉品质的影响盐度对瘤背石磺生长性能和肌肉营养成分有显著影响,结果显示:(1)瘤背石磺在盐度25-45时生长良好,成活率在90%以上。同时,在盐度25时增重率、特定生长率和蛋白质效率均显著高于其余各盐度组(P<0.05),而饲料系数也显著降低(P<0.05)。(2)随着盐度的升高,瘤背石磺肌肉水分显著降低(P<0.05),粗灰分呈先下降后上升趋势,但对肌肉中钙和磷含量影响差异不显著(P>0.05);粗蛋白含量在盐度25时最高,为76.66%,而粗脂肪在高盐度时呈显著上升趋势(P<0.05),分别在盐度25和45时含量最低和最高。(3)除谷氨酸、天门冬氨酸和脯氨酸含量等氨基酸受盐度影响差异显著外,大多数氨基酸均随着盐度升高呈现先上升后下降的趋势,且在盐度25含量最高,但差异不显著。(4)盐度对于每一种脂肪酸的影响均差异显著,在盐度5至35范围内,n-3 PUFA和n-6 PUFA均呈现上升趋势,但n-3 PUFA/n-6 PUFA值也逐渐升高。与大多数海水贝类不同的是,瘤背石磺DHA含量远低于EPA。试验结果表明,盐度对瘤背石磺生长性能以及肌肉生化成分有显著影响,适宜的盐度可改善瘤背石磺的肌肉品质和风味,结合盐度对瘤背石磺肌肉中不饱和脂肪酸的影响,瘤背石磺适宜的养殖盐度为15-25左右。2盐度对瘤背石磺血淋巴生化指标和应激指标的影响盐度对瘤背石磺血淋巴生化指标和免疫应激指标均有显著影响。(1)低盐度时血糖浓度显著高于高盐度;白蛋白、球蛋白和总蛋白含量变化趋势一致,呈下降趋势,但在盐度35时含量较高;而随着盐度的升高,瘤背石磺血淋巴中甘油三酯含量呈下降趋势,但无显著影响。(2)碱性磷酸酶活性随着盐度的升高呈现下降趋势,而谷丙转氨酶随着盐度的升高呈现抛物线变化,且在盐度15时最高。(3)免疫指标与血液生化指标相一致,均在盐度胁迫时,诱导瘤背石磺机体发生一系列反应,对机体产生一定的损伤。试验结果表明,在低盐度时,瘤背石磺用于渗透压调节的能量多于高盐度,且过高和过低盐度均对瘤背石磺的肝胰腺产生损伤,造成血淋巴中谷丙转氨酶含量增多。3盐度对瘤背石磺消化系统组织结构的影响盐度能显著影响瘤背石磺幽门胃、贲门胃、肝胰腺以及肠道结构组织。随着盐度的升高,幽门胃和贲门胃细胞均出现不同程度的萎缩,而肝胰腺在低盐度时出现部分溶解现象,而高盐度时细胞损伤严重,盐度35-45时,出现空泡化。另外,高盐度对肠道绒毛细胞有破坏作用,肠绒毛萎缩。通过扫描电镜观察,随着盐度的升高,瘤背石磺前肠褶皱高度逐渐降低,至盐度35-45时表面逐渐呈现扁平化,消化吸收面积显著降低。试验结果表明,盐度对瘤背石磺消化系统组织结构有显著影响,盐度过高对消化系统组织损伤严重,消化吸收率显著降低,因此从组织学角度分析可见,盐度15左右是瘤背石磺适宜的养殖盐度。4盐度对瘤背石磺不同消化器官消化酶、消化道指数和肠道排空速率的影响盐度对瘤背石磺消化酶活性、消化道指数和肠道排空速率有显著影响。试验结果显示:(1)各消化酶在幽门胃、贲门胃、肝胰腺和肠中均有分布,但各消化器官之间酶活性差异显著(P<0.05)。不同消化器官中蛋白酶活性由大到小依次为幽门胃(1462.77±13.40 U/g)、肝胰腺(1021.73±15.12 U/g)、肠(369.12±10.70 U/g)和贲门胃(266.82±13.87 U/g);淀粉酶活性由大到小依次为肝胰腺(87.11±1.31 U/mg)、幽门胃(45.72±1.06 U/mg)、肠(26.52±1.05 U/mg)和贲门胃(23.68±0.82 U/mg);纤维素酶活性以肝胰腺(2.02±0.01 U/mg)最高,其次是肠(1.01±0.01 U/mg),最低的是幽门胃(0.53±0.01U/mg)。(2)盐度能显著影响其消化酶活性(P<0.05)。除肝胰腺中的蛋白酶以外,幽门胃、贲门胃、肝胰腺和肠中各消化酶随盐度升高基本均呈现先上升后下降的趋势,与此同时淀粉酶和纤维素酶分别在盐度15和25时活性最高,盐度45时活性最低。(3)盐度对瘤背石磺部分消化道指数(比肠长、比肠重和比贵门胃重)有显著影响,而随着盐度的升高,比内脏重、比肝胰腺重和比幽门胃重随着盐度的升高差异不显著p0.05)。(4)不同盐度组瘤背石磺的肠道食糜排空速率有一定的差异,盐度15~25组较先达到肠道排空状态,盐度45组最慢。试验结果表明,低盐度(盐度5~25)对各消化器官消化酶活性均具有激活作用;其中,盐度15-25时消化酶活性最高,有利于瘤背石磺对饵料的消化吸收;而当盐度高于25时,则会抑制消化酶活性。同时,盐度15~25时,瘤背石磺的消化道指数较低,肠道排空速率也相对较快。5盐度对瘤背石磺不同部位Na+/K+-ATP酶活性、围心腔液和腹腔液渗透压及离子含量(Na+、K+ 和 Cl-)的影响瘤背石磺的渗透压调节与环境盐度有一定的相关性。(1)瘤背石磺腹腔液和围心腔液的盐度和渗透压均随着环境盐度的升高而增高,且腹腔液的盐度和渗透压的增高幅度均大于围心腔液。(2)围心腔液中Na+、Cl-和K+含量随环境盐度的变化具有一致性,均呈先上升后下降的趋势,且各离子浓度均在盐度25时达到最大值,但盐度对Na+和Cl-含量有显著影响,对K+含量无显著影响。(3)瘤背石磺不同部位的Na+/K+-ATP酶活性具有组织特异性,贲门胃、肠、表皮、肌肉和围心腔膜等部位的Na+/K+-ATP酶活性较高,同时,盐度激活不同部位的Na+/K+-ATP酶活性具有显著差异性,肝胰腺、贵门胃和表皮的Na+/K+-ATP酶在低盐度时活性较高,而幽门胃、肠、肾及围心腔膜等在高盐度时Na+/K+-ATP酶被激活,酶活性较高。研究表明:盐度能显著影响瘤背石磺腹腔液和围心腔液的渗透压和离子浓度以及各器官的Na+/K+-ATP酶活性,贲门胃、肠和肌肉等均是其离子转运和渗透调节的主要部位,具有较强的渗透压调节能力。6瘤背石磺对9种常规饲料原料不同营养物质的表观消化率在适宜盐度下,以0.5%的三氧化二铬(Cr203)为外源指示剂,由70%基础饲料(螺旋藻)和30%试验原料组成试验日粮,研究瘤背石磺对鱼粉、肉骨粉、豆粕、玉米蛋白粉、棉籽蛋白粉、菜粕、棉籽粕、小麦粉和玉米粉9种饲料原料的干物质、粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、氨基酸、钙及总磷的表观消化率。结果显示,9种饲料原料的干物质、粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、总氨基酸、必需氨基酸、钙和总磷的表观消化率的范围分别为33.24%-55.29%、27.30%~79-35%、36.91%-69.81%、34.89%-65.04%、25.35%-75.78%、21.54%~72.57%、44.98%-74.64%和10.42%-32.15%。在7种蛋白饲料中,以玉米蛋白粉的各项营养物质的表观消化率较高,棉籽蛋白粉和棉粕次之;在2种能量饲料中,以玉米粉的各项营养成分的表观消化率较高,但低于玉米蛋白粉。由此可见,玉米蛋白粉可作为瘤背石磺优质饲料原料来替代或部分替代螺旋藻;同时,玉米粉和棉籽蛋白粉等也可以作为重要的饲料原料合理搭配、适量使用。