【摘 要】
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核桃（Juglans regia L.）,是胡桃科核桃属植物。核桃的果实营养丰富、木材坚实耐用,是一种重要的经济林树种。核桃的适应性强,在我国的种植范围广泛。核桃在生产中存在良种应用率不高、病虫危害严重等问题,因此,加快良种的繁育和加强抗逆品种的培育有利于推动核桃产业的发展。体细胞胚具有繁殖快、结构完整、植株再生率高等特点,研究核桃体细胞胚胎发生对核桃良种繁育和基因功能研究等方面有重要的意义。本研
【基金项目】
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西北农林科技大学试验示范站（基地）科技创新与成果转化项目（TGZX2020-05）；
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核桃（Juglans regia L.）,是胡桃科核桃属植物。核桃的果实营养丰富、木材坚实耐用,是一种重要的经济林树种。核桃的适应性强,在我国的种植范围广泛。核桃在生产中存在良种应用率不高、病虫危害严重等问题,因此,加快良种的繁育和加强抗逆品种的培育有利于推动核桃产业的发展。体细胞胚具有繁殖快、结构完整、植株再生率高等特点,研究核桃体细胞胚胎发生对核桃良种繁育和基因功能研究等方面有重要的意义。本研究以‘香玲’核桃为实验材料,探究影响‘香玲’核桃体细胞胚胎发生影响因素,对‘香玲’核桃体细胞胚胎发生过程的适宜外植体、最佳离体培养条件进行筛选,并对体胚的增殖和成熟培养进行了初步探讨,主要研究结果如下:1.核桃外植体茎段和果实最佳消毒方法为70%酒精30s+0.1%Hgcl2消毒10min。花药适合的消毒方式为70%酒精30s+5%NaClO（有效氯8%）消毒8min+0.1%Hgcl2消毒3min的表面灭菌方式。2.核桃体胚诱导的最佳外植体材料为幼胚,花后第8周采样,胚性愈伤诱导率为66.67%。胚珠的胚性愈伤组织诱导率次之,诱导率为53.33%。3.核桃幼胚愈伤组织诱导的最适外源激素配比为DKW培养基添加2.0mg/L 6-BA+1.0mg/L 2,4-D,诱导率为96.67%,此时体胚发生为间接发生途径;DKW培养基添加1.0mg/L TDZ的诱导率为80.00%,此时体胚发生多为直接发生途径。4.核桃幼胚愈伤组织诱导培养基添加0.5g/L谷氨酰胺时诱导胚性愈伤组织率为66.67%;添加30g/L的蔗糖浓度的胚性愈伤诱导率为65.6%。黑暗培养条件下诱导胚性愈伤组织率为63.33%,高于光照处理诱导率,核桃体胚的诱导过程适宜在暗培养条件下进行。5.体胚的增殖培养基为DKW液体培养基添加1.0mg/L6-BA+0.25mg/LNAA+0.5g/L谷氨酰胺+30g/L蔗糖,增殖方式为液体悬浮培养,增殖率为315.60%。6.体胚的成熟:成熟培养基为DKW培养基添加45g/L蔗糖+2.0mg/LABA+7g/L琼脂可以有效促进体胚成熟。
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