目的用乙脑病毒感染C57BL/6小鼠,明确病毒能否造成小鼠周围神经损伤;在此之上,运用Label-free蛋白质组学方法筛选小鼠坐骨神经中差异表达蛋白,生物信息学分析蛋白的功能及信号通路,从而探索乙脑病毒诱导小鼠周围神经损伤的发病机制,为进一步研究药物靶点及开发抗病毒治疗提供可参考的实验室依据。方法乙脑病毒感染小鼠,观察动物行为确定小鼠发病;双侧坐骨神经肌电图,明确周围神经病变情况;坐骨神经免疫荧光及透射电镜证实坐骨神经的病理改变;Western blot测定JEV-E、MBP及NF-H的蛋白表达量,进一步证实动物模型的成功构建;在模型动物基础上,通过Label-free蛋白质组学筛选感染组与对照组小鼠坐骨神经的差异表达蛋白,RT-q PCR及Western blot验证质谱鉴定的可靠性,利用生物信息学方法分析差异表达蛋白的功能,Western blot检测炎性细胞因子的表达,明确JEV诱导PNI的可能发病机制。结果接种乙脑病毒的小鼠出现毛发松散,精神萎靡,体重下降,活动减少,关节僵硬,行走不稳,肢体瘫痪等表现;肌电图示双侧坐骨神经传导速度在发病4天即显著降低,而波幅明显降低仅出现在第15天,潜伏时没有显著延长;免疫荧光示MBP荧光强度在第4天即明显下降,而NF-H荧光强度在15天时呈现出显著降低;透射电镜见坐骨神经早期即存在典型的脱髓鞘改变,之后合并轴突的萎缩变性;Western blot示JEV-E蛋白在坐骨神经中表达升高;MBP表达初期即升高,持续至15天时略有降低,而NF-H表达仅在15天时显著降低。质谱鉴定到坐骨神经中4303个蛋白,筛选出差异表达蛋白187个,表达上调的105个,下调的82个。RT-q PCR及Western blot证实质谱结果可靠。生物信息学分析发现下调蛋白集中表现在翻译等生物学过程,而上调的蛋白主要作用于免疫应答反应,Western blot检测炎性细胞因子的表达升高。结论乙脑病毒诱导C57BL/6小鼠坐骨神经先出现以脱髓鞘为主,之后伴有轴突变性的损伤。这种损伤是病毒通过下调宿主线粒体功能,导致ROS过度产生引起氧化应激及DNA损伤,上调宿主自身免疫应答反应,免疫反应失衡,导致炎症因子的过度表达,介导周围神经炎性损伤及细胞凋亡。