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线粒体通过氧化磷酸化产生能量,并且通过呼吸链复合体电子传递链产生ATP。线粒体是一种半自主性细胞器,拥有自身的基因组。在粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)中,线粒体基因组(mtDNA)的表达对线粒体功能的发挥至关重要,并且线粒体基因组编码氧化磷酸化复合物的7个关键亚基。Mtf2 蛋白(系统名:SPAC5D6.12)在芽殖酵母(Saccharomyces cerevisiae)中存在同源蛋白Naml。已有文献报道,Naml是一个定位于线粒体基质的蛋白,参与线粒体基因组编码的COX1,CYTB1以及ATP6的mRNA加工与稳定,Naml对于COX1和CYTB内含子的剪接也是必要的,并且Naml对线粒体基因组编码的蛋白合成的影响是全局的。通过实验室成员的前期实验,我们发现△mtf2菌株在非发酵型培养基上的生长受到强烈的抑制,由此我们推测mft2基因与线粒体功能密切相关。在本论文中,我们主要研究了 Mtf2蛋白在线粒体中发挥的具体功能。首先,我们发现Mtf2蛋白定位于线粒体基质,是一个可溶性蛋白。其次,通过qRT-PCR以及Northern blot实验,在含有线粒体内含子的背景下,敲除mtf3导致coxl mRNA水平显著性下降,并且引起cobl的mRNA的累积量明显减少,说明Mtf2蛋白对于coxl和cobl mRNA的累积是必不可少的。在不含有线粒体内含子的背景下,敲除mtf2扣不影响coxl和cobl的mRNA水平,但仍然强烈影响Coxl的合成,说明Mtf2蛋白对Coxl蛋白合成至关重要,是Coxl蛋白翻译的激活因子。最后,通过western blot实验分析,我们发现在不含有线粒体内含子的背景下,mtf2缺失菌株中几乎检测不到Coxl和Cox3蛋白,Cobl和Cox2的蛋白稳态水平也是显著性的降低,而核基因编码的蛋白Cox4稳态水平只有轻微的下降,说明mtf2缺失导致组成线粒体呼吸链上的复合体不能正常组装,最终导致线粒体功能受损。我们推测,在含有线粒体内含子的背景下,mtf2缺失对mtDNA中内含子剪接的影响可能是由于Coxl蛋白合成受损导致不能正常合成coxl内含子编码的成熟酶。