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四环素类抗生素是一种人畜共用的广谱抗菌物质,在自然环境中主要以盐酸盐的形式存在。环境中出现过量的四环素类抗生素会使病原菌容易诱导出抗药菌株,且过量抗生素最终富集到人体会损害人体肾功能和细胞造血功能,威胁着人类的健康和生存环境。四环素类抗生素也是环境中抗生素的主要来源,主要包括四环(TC)、土霉素(OTC)、多西环素(DXC)、美他环素(MTC)等。由于其含量低,因此要建立一种高效快速的方法来分离检测四环素类抗生素残留,以降低四环素类抗生素对人类及环境的威胁。本文基于小分子醇双水相体系和小分子有机物双水相体系,建立了(乙醇/丙酮)-(NH4)2SO4形成的二元双水相体系。并利用该体系对盐酸四环素以及盐酸多西环素进行实验研究。具体研究成果如下:(1)根据小分子醇双水相体系和小分子有机物水相体系创建了醇与小分子有机溶剂二元双水相体系。(2)(乙醇/丙酮)-硫酸铵二元双相对盐酸四环素分离萃取研究,研究了分相盐、醇及小分子有机物的类型、用量及比例,温度,溶液酸度,共存物质对盐酸四环素分配行为的影响。结果表明,硫酸铵浓度为41%,无水乙醇与丙酮体积比为2:1,溶液酸度在pH4.5~5范围,温度为25℃二元双水相体系对四环素有较高萃取率可达90%和分配系数达到57。当测试允许相对误差为±7%时,浓度为75mg·L-1的盐酸四环素,浓度为10%的K+、Na+、F-、Cl-、NO3-、Br-对测定结果无干扰,1.5倍的盐酸美他环素、35倍的氯霉素、35倍的青霉素和35倍的红霉素、80倍的淀粉和80倍的蔗糖、400倍的葡萄糖和400倍的果糖对测定结果不发生干扰。(3)选定的(乙醇/丙酮)-硫酸铵二元双相对盐酸多西环素分离萃取研究,考察了(NH4)2SO4浓度、乙醇与丙酮用量、pH值、温度以及盐酸多西环素浓度对盐酸多西环素分配行为的影响。结果表明:体系的pH值在4.5~5.0范围内,温度在25℃且盐酸多西环素的质量浓度在45mg/L-65mg/L之间,(NH4)2SO4浓度为41%,,萃取率可达93.61%,分配系数可达83.081。在最优实验条件下,当允许相对误差为±6%时,大量Na+、K+、Cl-、NO3-、F-、Br-对测定结果无干扰,400倍的葡萄糖和400倍果糖、90倍的淀粉和90倍蔗糖、40倍的氯霉素、40倍的青霉素和40倍的红霉素,2倍的盐酸美他环素不干扰测定。