葛仙米以其资源稀少、营养价值丰富,独特的生物活性和药理作用而引起人们广泛地关注。葛仙米作为一种食药同源的传统食品已有几千年的历史,但对其主要活性成分的研究很少。近年来,仅少数人对其生理和基本的生化组成进行了研究。为探讨葛仙米中的生物活性成分,本文以野生葛仙米藻红蛋白为研究对象,在系统研究葛仙米藻红蛋白的提取、分离和纯化的基础上,利用生物大分子研究的最新技术和现代分离、分析手段,尝试揭示葛仙米藻红蛋白的结构与生物活性及二者间的关系。其主要结果如下: 1 葛仙米的生态条件及分布规律与生化组成研究 以湖北省鹤峰县走马镇野生葛仙米为研究对象,对其生态条件及分布规律与生化组成作了较系统的分析。测定了其水分、蛋白质、脂肪、多糖、类胡萝卜素、叶绿素、矿物元素的含量。 2 葛仙米藻红蛋白的提取、分离、纯化和鉴定 以脱脂葛仙米为原料,采用盐溶和盐析的方法,首次从葛仙米中制备出清蛋白、球蛋白和盐溶蛋白,并确定了适合葛仙米藻胆蛋白提取制备的最佳工艺,其最佳工艺条件为,缓冲液pH值为7.3、浸提时间4.3h、盐浓度0.21mol/L,葛仙米藻胆蛋白最大得率为7.13%。 利用DEAE-Cellulose 52离子交换层析,采用步进式洗脱模式成功地将葛仙米盐G-25凝胶色谱,进一步纯化葛仙米藻红蛋白,得到均一的藻红蛋白。柱层析法、分光光度法、荧光光谱法和电泳法鉴定其为具有色谱纯和电泳纯的样品。 3 葛仙米藻胆蛋白稳定性研究 研究了温度、pH、光强、酒精浓度、中性盐浓度和蔗糖浓度等因子对其稳定性的影响。结果表明,葛仙米藻胆蛋白在自然光照下,温度为40℃以下,pH为5～8,酒精浓度小于40°,低浓度中性盐和低浓度蔗糖溶液能保持较好地稳定性。 4 葛仙米藻红蛋白部分分子构象的表征 采用SDS-PAGE和常规PAGE电泳,FFIR、CD、AFM和DSC等分析技术,