孕鼠体内高胆酸水平对胎鼠大脑影响的初步研究

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目的探讨孕鼠体内高胆酸水平对胎鼠脑组织形态及功能的影响。探讨不同胆酸浓度下胎鼠血清中神经元特异烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE)水平的差异及其与血清胆酸浓度的关系。方法将30只清洁级成年妊娠SD大鼠随机分为A、B、C三组,每组10只。在妊娠第13~20天,A组孕鼠每天一次腹腔注射纯胆酸5.5mg·kg-1·d-1(高胆酸组);B组孕鼠每天一次腹腔注射纯胆酸1.4mg·kg-1·d-1(低胆酸组);C组(对照组)同步注射等量生理盐水。妊娠第21天剖腹取胎,测定胎鼠体重及死亡率。采集孕鼠和胎鼠血样测定总胆汁酸(TBA)浓度,同批胎鼠血样采用ELISA法测定血神经元特异烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)水平。同时,胎鼠断头取脑,分别光镜和电镜观察胎鼠大脑病理改变。结果1.干预前孕鼠血清ALT、AST、TBIL、DBIL浓度在各组间比较均无显著差异,P>0.05。干预后孕鼠血清ALT、AST、TBIL、DBIL水平在A组明显高于C组,比较有显著差异,P>0.05;A组、C组与B组比较无显著差异,P>0.05。孕鼠血清TBA浓度在A、B、C各组间两两比较均有极显著差异,P<0.01。2.三组孕鼠及胎鼠血清TBA浓度分别为A组(22.32±8.12)μmol/L,(28.84±8.06)μmol/L;B组(9.77±3.56)μmol/L,(9.34±3.55)μool/L;C组(3.60±1.78)μmol/L,(3.95±1.19)μumol/L。两两组间比较均有极显著差异,P<0.01。孕鼠血清TBA和胎鼠血清TBA浓度呈正相关r=0.875。3.胎鼠死产率在A、B、C三组中分别是30.10%,16.85%和7.06%,两两组间比较有显著差异,P<0.05。胎鼠平均体重在A、B、C三组中分别是(4.24±0.98)g,(5.82±0.32)g和(6.14±0.77)g,A组低于B组和C组,比较有显著差异,P<0.05;B组与C组比较无显著差异,P>0.05。4.三组胎鼠血清NSE浓度在A、B、C三组中分别是(31.90±13.12)ng/ml,(13.91±5.85)ng/ml和(9.33±3.94)ng/ml,A组明显高于B组及C组,P<0.01;A组与B组比较无显著差异,P>0.05。胎鼠血清NSE与TBA浓度呈正相关r=0.758。5.胎鼠大脑皮层组织光镜下病理改变:大脑皮层组织层次紊乱,神经元变性坏死,密度降低,胞核固缩深染。胎鼠神经元变性面积积分在A、B、C三组中分别是(1.38±0.58),(1.48±0.66)和(0.72±0.30),A组和B组明显高于C组,P<0.01;A组与B组比较无显著差异,P>0.05。胎鼠神经元变性面积积分与胎鼠血清NSE浓度相关系数为0.282。胎鼠神经元坏死面积积分在在A、B、C三组中分别是(1.84±0.73),(0.86±0.38)和(0.58±0.27),A组明显高于B组和C组,P<0.05;B组与C组比较无显著差异,P>0.05。胎鼠神经元坏死面积积分与胎鼠血清NSE浓度呈正相关r=0.798。6.胎鼠顶叶大脑皮层透射电镜下改变:神经细胞核膜双层结构模糊,核固缩核仁消失,染色质浓缩;内质网和线粒体数目明显减少,残留线粒体肿胀破坏,嵴空化消失。三组胎鼠大脑皮质内线粒体数密度(Nv)在A、B、C三组中分别是(21.92±9.00)μm-3,(45.48±13.12)μm-3和(36.13±12.13)μm-3。A组明显低于B组和C组,P<0.01;B组与C组比较无显著差异,P>0.05。胎鼠大脑皮质内线粒体平均体积((?))在A、B、C三组中分别是(7.01±1.79)×10-4μm3,(5.66±1.57)×10-4μm3和(3.15±1.21)×10-4μm3。A组和B组明显高于C组,P<0.01;B组与C组比较无显著差异,P>0.05。结论胆酸可使胎鼠脑组织出现明显的病理学改变,低浓度胆酸主要导致神经细胞变性和线粒体体积增大,高浓度胆酸组主要导致神经细胞坏死和线粒体数目减少。胎鼠血清NSE和TBA浓度成正相关。
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