论文部分内容阅读
极性生长是真核生物的主要特征,建立和保持极性生长是通过信号通路的调节来实现的。丝状真菌的生长模式是细胞极性生长的典型例子。由于构巢曲霉有许多独特的优点,使其成为研究极性生长的很好的模式生物。
本课题利用乙醇脱氢酶启动子(alcA promoter)替换技术和绿色荧光蛋白(GFP)和黄色荧光蛋白(YFP)标记技术研究构巢曲霉中MobB和CotA对极性生长的作用,观察目的基因在构巢曲霉中的表达定位,并且研究环境胁迫对于cotA,mobB突变菌株表型的影响,以及深入研究环境胁迫下产生表型变化的分子机理。
此研究发现通过乙醇脱氢酶启动子关闭MobB基因以及敲除MobB基因使其完全丧失了产分生孢子的能力,引起了严重的生长缺陷并且菌丝分叉。构巢曲霉中cotA突变株的表型与mobB突变株的相似。此外,研究发现MobB和CotA相互作用作为一个复合体发挥功能。当在培养基中加入渗透性环境胁迫子后,mobB和cotA突变菌株表现出了菌丝延长,菌丝恢复极性生长,但是钙通道的抑制剂或螯合剂抑制了mobB和cotA突变株的表型恢复。
以上结果表明MobB和CotA复合体对于构巢曲霉维持其正常细胞的极性生长是必须的;此外,试验数据表明渗透性环境压力可使mobB和cotA突变株绕过MobB/CotA参与调节的信号通路,通过其他信号通路促使其细胞的极性恢复;进一步的研究发现潜在的Ca2+的释放与mobB和cotA的渗透抑制有关。