【摘 要】
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目的:基于神经-内分泌-免疫网络,观察葫芦巴总黄酮对EB、EB联合P致小鼠乳腺增生模型和EB联合P并复合夹尾致大鼠乳腺增生模型的影响,探讨葫芦巴总黄酮对乳腺增生的作用特点,及其在治疗乳腺增生时的药效机制。方法:实验1:通过腹腔注射EB制备小鼠乳腺增生模型。小鼠每2天注射1次EB,每次0.5mg/kg,连续15次。选取乳头隆起小鼠60只随机分为MCG,RPXG,HTFF、MTFF、LTFF,各给药组
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目的:基于神经-内分泌-免疫网络,观察葫芦巴总黄酮对EB、EB联合P致小鼠乳腺增生模型和EB联合P并复合夹尾致大鼠乳腺增生模型的影响,探讨葫芦巴总黄酮对乳腺增生的作用特点,及其在治疗乳腺增生时的药效机制。方法:实验1:通过腹腔注射EB制备小鼠乳腺增生模型。小鼠每2天注射1次EB,每次0.5mg/kg,连续15次。选取乳头隆起小鼠60只随机分为MCG,RPXG,HTFF、MTFF、LTFF,各给药组每天按剂量灌服药物,共给药30天。末次给药2h后,测量小鼠乳头高度及直径;取材,检测血清中E2、P、Gn RH、PRL、FSH、LH水平变化;计算胸腺、脾脏、子宫、卵巢脏器指数,通过光镜观察乳腺、胸腺、脾脏组织形态学变化。实验2:通过腹腔注射EB联合P制备小鼠乳腺增生模型。小鼠每天注射EB0.5mg/kg,连续25天,从第26天开始改为注射P 4mg/kg,连续5天。在注射EB的第5天,选取乳头隆起小鼠60只随机分为MCG、RPXG、HTFF、MTFF、LTFF,各组灌服相应剂量药物30天。末次给药2h后,测量小鼠乳头高度及直径,取材,检测血清中E2、P、PRL、T、ER、PR、NE、EPI、IL-2、TNF-α水平变化;计算胸腺、脾脏、子宫、卵巢脏器指数,通过光镜观察乳腺、胸腺、脾病组织形态学变化;用免疫组化法检测乳腺组织中的ERα、PR、Bcl-2的阳性表达,检测垂体中Gn RHR阳性表达。实验3:通过腹腔注射EB联合P并复合夹尾制备大鼠乳腺增生模型。大鼠注射EB25天,剂量为0.5mg/kg,随后肌肉注射P,4mg/kg,连续5天,并从造模第1天开始,使用燕尾夹在距大鼠尾根部5cm处夹尾20min,连续30天。在注射EB第5天时,将乳头隆起大鼠60只随机分组,各组每天灌服相应剂量药物,连续30天。观察大鼠乳头肿胀程度,毛发及情绪状态。末次给药2h后,测量大鼠左侧第二对乳头直径与高度,取材,检测血清中E2、P、FSH、LH、Gn RH、PRL、T、ER、PR、EPI、NE、IL-2、TNF-α、VEGF、b FGF水平;计算胸腺、脾脏、卵巢、子宫脏器指数,观察乳腺、胸腺、脾脏组织形态学变化;用免疫组化法检测乳腺组织中的ERα、PR、Bcl-2、Fas、Fasl蛋白的表达,下丘脑中Gn RH、垂体中Gn RHR蛋白表达情况。结果:实验1:与模型组相比,RPXG、HTFF、MTFF、LTFF小鼠乳头隆起、溢液情况减少,乳头高度和直径降低;子宫、脾脏、卵巢指数降低、胸腺指数升高;不同程度降低血清中E2、Gn RH、PRL、FSH水平,升高LH、P水平;乳腺、胸腺、脾脏的病理变化得到不同程度改善。实验2:与模型组相比,RPXG、HTFF、MTFF、LTFF小鼠乳头的隆起、红肿情况得到改善,高度和直径显著降低;血清中生化指标、乳腺组织蛋白表达、脏器病理改变均得到改善,血清中E2、PRL、ER、PR、EPI、NE、TNF-α水平不同程度降低,P、T、IL-2水平升高;不同程度降低乳腺组织Bcl-2、ERα、PR阳性表达,降低垂体中Gn RHR阳性表达。实验3:与模型组相比,RPXG、HTFF、MTFF、LTFF大鼠情绪缓和,毛发健康,乳头红肿、隆起情况得到改善,乳头高度和直径显著降低;不同程度降低血清中E2、FSH、Gn RH、PRL、ER、PR、EPI、NE、TNF-α、VEGF、b FGF水平,升高P、LH、T、IL-2水平,降低乳腺组织Bcl-2、Fasl、ERα、PR阳性表达,升高Fas阳性表达,降低下丘脑Gn RH、垂体Gn RHR阳性表达;改善乳腺、胸腺、脾脏的病理状况。结论:1.大、小鼠乳腺增生模型均制备成功。2.葫芦巴总黄酮可以不同程度改善乳腺增生大、小鼠的精神状态,表观指标及生化指标、蛋白表达,通过调节乳腺增生动物神经-内分泌-免疫网络,从而达到治疗乳腺增生的目的。
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