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猫泛白细胞减少症是由猫泛白细胞减少症病毒(FPV)引起的一种急性高度接触性传染病。在自然状态下,FPV能感染几乎所有的猫科、鼬科及浣熊科动物,引起猫、水貂、浣熊等动物很高的死亡率,对野生动物和特种经济动物构成极大的威胁。目前,控制该病的主要手段是进行免疫接种。为了有效地控制该病在我国大型野生猫科动物中的发生和流行,迫切需要掌握FPV在虎群中的感染和流行毒株的遗传变异情况,积极研制安全有效的新型疫苗。本研究利用微量血凝抑制试验首次对我国东北某野生动物园的圈养虎进行了血清FPV HI抗体调查,并对近年来从我国不同地区收集的疑似FPV感染的虎粪便进行了PCR检测和病毒的分离鉴定,同时对分离的FPV毒株VP2基因进行了克隆、测序和遗传进化分析。在此基础上,开展了FPV GT-2株VP2主要抗原蛋白基因在毕赤酵母中的表达和以犬2型腺病毒(CAV-2)为载体的VP2重组病毒的构建及家猫实验免疫研究。结果,在调查的184份虎血清中FPV HI抗体阳性率为49.5%,表明FPV在此虎群中感染十分普遍。对24份疑似FPV感染的虎粪便样品进行的PCR检测结果显示9份阳性。用F81传代细胞从9份PCR检测阳性粪便样品中成功分离获得了HT-69、GT-2、GT-3、JF-1、JF-3、ZF-5和SM-4等7株FPV。序列测定表明,7株FPV VP2基因全长均为1755个核苷酸,编码584个氨基酸,与FPV标准毒株CU-4 VP2基因大小相同。7个FPV分离株核苷酸序列的同源性为99.2~99.8%,氨基酸的同源性为98.1~99.8%。基于FPV VP2基因的系统发生分析表明,不同的FPV毒株可划分为两个基因群:第一群(基因I群)包括FPV d、CU-4等国外早期分离的毒株;第二群(基因II群)包括377和本实验室从虎中新近分离的7个毒株。国内7个FPV流行毒株VP2基因存在一定的变异现象,但大部分变异为同义突变,错义突变以散发的点突变为主。将FPV GT-2株VP2基因克隆到pPICZαA中,在毕赤酵母中实现了VP2蛋白的分泌性表达,用所表达的VP2重组蛋白免疫小鼠,证实其具有良好的免疫原性。以感染性CAV-2全基因组为载体,首次构建了含有FPV VP2基因的CAV-2-VP2重组病毒。