目的探讨NES1基因在正常肝细胞和肝癌细胞株中的表达、甲基化状态,及甲基化对基因表达和细胞生物学的影响。方法用RT-PCR和RT-QPCR检测NES1mRNA在正常肝细胞L02以及肝癌细胞株HepG2中的表达水平,用MSP检测NES1基因的甲基化水平。用去甲基化药物(5-aza-dC)处理肝癌细胞株后,再用RT-QPCR检测NES1mRNA的表达水平,MTT法检测细胞的存活率,Western Blot检测cyclinD1,P21,P53表达水平。结果NES1mRNA在正常肝细胞中的表达水平明显高于肝癌细胞株。肝癌细胞株中NES1外显子3 CpG岛的甲基化水平较正常肝细胞明显升高。肝癌细胞株经去甲基化药物处理后,NES1 mRNA表达水平明显上升,细胞的存活率明显下降,P21,P53表达水平明显上升,cyclinD1表达水平明显下降。结论NES1基因外显子3 CpG岛的超甲基化和它在肝癌细胞株中的低表达相关,在肝癌细胞中NES1基因表达缺失的分子机制可能是基因外显子3CpG岛的超甲基化。肝癌细胞株的增殖受到抑制的原因可能是去甲基化药物(5-aza-dC)对细胞周期的阻滞。