以细胞外和细胞内细胞因子检测评估儿童慢性乙型肝炎的Th1/Th2应答

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目的Th1与Th2应答与转换对HBV感染的进程和转归,特别是对小儿乙型肝炎慢性化可能有重要影响。IFN-γ和IL-4已被认为是Th1/Th2代表性的细胞因子。本研究旨在以细胞外和细胞内细胞因子检测了解HBV携带者和慢性乙型肝炎小儿Th1/Th2应答的平衡状态,并探讨两种检测技术的应用意义。方法采用流式细胞术检测慢肝乙肝(CHB)、无症状HBV携带者(ASC)及健康(NORMAL)小儿的外周血细胞内IFN-γ和IL-4,采用双抗体夹心E L I S A法检测其血浆中的IFN-γ和IL-4。结果用ELISA检测的血浆IFN-γ浓度(pg/ml):CHB组(37.28±21.80,n=23),ASC组(51.28±14.85,n=31),NORMAL组(52.68±15.47,n=34);血浆IL-4浓度为:CHB组(44.13±16.32),ASC组(44.01±12.56),NORMAL组(63.94±20.57);Th1/Th2的比值:CHB组(1.04);ASC组(1.03);NORMAL组(0.93)。这些数值经统计学分析,组间两两比较,差别均无显著意义(p> 0.05)。用流式细胞术检测,胞内表达IFN-γ的细胞(Th1)百分比为:CHB组(7.68±4.62),ASC组(11.71±4.36),NORMAL组(13.61±6.71),组间差别有显著意义;胞内表达IL-4的细胞(Th2)百分比为:CHB组(7.77±3.15),ASC组(8.01±2.44),NORMAL组(10.44±2.26),组间差别无显著意义;Th1/Th2的比值:CHB组(0.96±0.30),ASC组(1.67±0.76),NORMAL组(2.11±1.12),组间两两比较,差别均有显著意义(p< 0.05)。结论流式细胞技术检测结果,提示小儿从HBV无症状携带者到慢性肝炎患者,体内Th1应答水平及Th1/Th2细胞比值均显著低下而以后者降低尤为显著,而Th2应答无明显变化,胞内Th1/Th2细胞比值与对照组相比也明显降低,胞内因子表达失衡,患者细胞免疫功能受抑制。用ELISA定量检测血浆中的Th1和Th2细胞因子及其比值,提示在CHB和ASC小儿均未比健康小儿有显著下降。流式细胞技术检测反映的Th1和Th2数量与二者的比例,可能更真实反映机体免疫状态与疾病的关系。
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