发菜蓝藻光敏色素互作蛋白的筛选与鉴定

来源 :华中师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lym50691064
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
蓝藻光敏色素(CBCRs)是蓝藻中一类重要感受光的功能色素蛋白,能够响应近紫外光到远红光范围的光信号,同时还具有植物光敏色素的可逆光转换效应。随着分子生物学和基因工程技术的发展,近些年来CBCRs的分子结构、光化学性质、生物合成研究取得较大进展,但有关CBCRs生物学功能以及参与的光信号转导机制研究报道还比较有限。本实验以陆生蓝藻发菜为研究对象,在前期实验室已完成CBCRs的筛选及其光化学性质研究工作的基础上,开展发菜中CBCRs互作蛋白的筛选与鉴定研究,以期为CBCRs参与的光信号转导机制、生理代谢途径奠定基础。基于发菜中已鉴定出较多响应红光的光受体,本研究挑选6个响应红光的CBCRs(COO9105367、COO9105935、COO9107954、COO9108839、COO9100652、COO9103972)进行互作蛋白的筛选与鉴定。采用酵母双杂交技术筛选发菜总cDNA文库和转录因子文库,以期获得与发菜CBCRs相互作用的蛋白。通过文库的筛选、鉴定、酵母双杂交点对点验证、以及体外Pull-down实验,初步获得了一些与发菜CBCRs相互作用蛋白。通过发菜cDNA文库筛选,鉴定到蓝藻光敏色素COO9103972、COO9107954、COO9105935相互作用蛋白,选择部分候选互作蛋白进行酵母双杂交点对点验证。结果显示:蓝藻光敏色素COO9103972能与多药外排泵亚基AcrA(COO9100532)、DNA 修复蛋白(COO9106633、锌蛋白酶(COO9102658)、孔蛋白(COO9107068)发生相互作;COO9107954能与四个蛋白发生相互作用,它们分别为TPR家族蛋白(COO9100200)、FtsH 蛋白(COO9103537)、蛋白水解酶(COO9105428)、ATP依赖性蛋白酶(COO9103305);COO9105935能与两个蛋白发生相互作用,分别是多药外排系统蛋白emrA(COO9105192)以及离子通透酶(COO9111272)。发菜CBCRs大多含有组氨酸激酶结构域,暗示它们可能与转录因子发生相互作用,参与光信号调控过程。本研究对上述6个响应红光的CBCRs进行发菜转录因子文库的筛选,最终筛选出6个转录因子能够与它们发生相互作用。其中COO9105367能与转录因子COO9103874、COO9100313发生相互作用;COO9107954 能与转录因子 COO9103874、COO9100313、COO9107955 发生相互作用;COO9108839、COO9105935均能与转录因子COO9103874发生相互作用;COO9100652 能与转录因子 COO9103874、COO9100313、COO9110495、COO9103149、COO9106808发生相互作用;COO9103972能与转录因子COO9103874、COO9106808发生相互作用。其中,蓝藻光敏色素COO9107954在基因组上位于其互作转录因子COO9107955上游相邻位置,推测二者可能形成二元信号转导组分。研究表明,转录因子COO9103874在Nostoc sp.PCC 7120中的同源蛋白Alr3768(OrrA)具有调控多糖合成、响应干旱、渗透胁迫等功能。而转录因子COO9100313所属家族蛋白具有参与调节碳代谢反应、应激反应等功能。这些筛选到的互作蛋白可能与发菜长期耐受干旱、高紫外辐射、快速吸水恢复生理活性的特性相适应。本研究可为后期研究处于极端生境中发菜的光信号转导机制提供依据,为探究发菜蓝藻光敏色素生理功能或光生物学作用奠定基础。
其他文献
教材作为国家意志的集中体现,是在国家教育理念和教学目标的指导下,将既定的教学内容具体呈现的载体.在一定程度上,有什么样的教科书,就会有什么样的年轻一代,也就会有什么样的国家和未来,因此教材在开展基础教育的过程中起到至关重要的作用.通过研究不同国别的教材编写思路和编写内容,可以发现不同版本教材中存在的优势和教学价值,弥补当前教材中编写不合理的地方,为高中数学课程及教学的改革实施作出进一步的调整与指导
将人性化设计理念与城市道路设计相结合,不但能保证社会公众出行的安全性,还能贯彻人与自然和谐共处的基本原则,这也是推动城市道路设计未来发展的必然选择。本文简要概述了人性化设计理念在城市道路设计中的意义,分析了人性化设计理念在城市道路设计中的具体应用,旨在为城市道路设计人员提供理论参考。
实践性知识于教师教学实践中形成,是教学经验的高度概括与试炼,在教师自身成长和专业发展过程中占有重要的地位。已有研究表明,实践性知识在继续教育、教师培训、专家讲座及教研活动等一系列教师专业发展途径中应该被贯彻始终。随着研究的深入,如何有效地促进教师实践性知识提升成为相关研究日趋关注的问题。教师的实践性知识与日常教学工作紧密相连,结合教学实际对教师实践性知识发展的现状进行调查分析,从中发现深层问题,探
板书是数学课堂教学重要的辅助手段,是数学课堂不可或缺的一部分。板书可以弥补教师口头语言的不足,帮助教师完成教学任务,便于学生掌握知识。因此,教师课堂板书行为对教学质量有重大影响。以往的许多研究致力于对教师的课堂板书行为进行评价,虽然提出了不少有价值的建议,但是这些建议对改善教师板书行为效果甚微。本研究从诊断的视角出发,通过构建数学课堂板书行为诊断指标体系,以期诊断出教师板书行为存在的问题,并提出解
2003年版课标和2017年版课标的核心指导思想,都是以学生发展为本。2003年版课标着重强调在教育教学过程中要注重学生能力发展;2017年版课标注重强调要培养学生的核心素养,强调重视过程性评价,尤其是在立德树人方面做了明确要求。三角函数作为一种基本初等函数,在高中数学中具有重要的作用,它不仅是代数与几何的重要知识纽带,而且也是学生在初等教育中接触到的最基础、最典型的一类周期函数,因此对于三角函数
动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是导致心脑血管病病理基础。目前推算心血管病现患人数3.30亿,男性多于女性,在中国每5例死亡中就有2例死于心血管病[1]。自2017年《动脉粥样硬化中西医结合诊疗专家共识》发布以来,为规范中西医结合诊疗方案,提高AS治疗水平提供了依据。但随着对AS研究的深入,中西医的诊断和治疗有新的进展。因此由中国医师协会中西医结合分会心血管专业委员会和中
期刊
产业集聚有利于发挥集聚经济外部性,是加快城市经济高质量发展的重要途径。本文基于2005—2018年中国278个城市面板数据,采用SBM-DEA模型对各城市经济高质量发展水平进行测度,并通过运用GIS空间分析和空间杜宾模型,深入分析产业集聚空间格局演变及其与城市经济高质量发展之间的关系。研究发现:(1)在考虑不同空间权重矩阵情况下,产业集聚对经济高质量发展提升具有显著正向直接效应和空间溢出效应,且高
新一轮国家基础教育课程改革的一个重要而具体的目标,就是要改变到目前为止仍然屡见不鲜的学生被动接受知识内容、反复使用题海战术的学习策略,倡导学生自主参与学习的探究性学习。目前我们所倡导的“探究性学习课程”暨基于问题的学习(Problem-Based Learning,简称PBL)主要以杜威的理论和社会文化理论为基础,以问题为中心;学生基于自己对问题的理解和所持观点以自主学习和小组合作等形式开展调查研
在当前的互联网时代,各行各业都与计算机相融合,从而产生了数据信息化管理的变革。语言文字事业作为国家综合实力不可或缺的一部分,记载着民族的精神,是民族文化的载体。然而当下国家语委对于语言文字科研项目的评审和管理还是半信息化的状况,随着数据量的增加,传统的项目评审和管理方式已经不能满足当今的审核要求。为了缓解国家语委工作人员的工作强度,提升科研项目审核的效率以及公正性,从侧面推动语言文字事业的发展,设