【摘 要】
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近年来,随着转基因动物制备技术的日趋成熟与完善,建立转基因动物模型已成为研究真核基因表达调控的一种重要手段.利用转基因技术研究真核基因的表达,既可以在分子水平上设计
【出 处】
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中国协和医科大学 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部
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近年来,随着转基因动物制备技术的日趋成熟与完善,建立转基因动物模型已成为研究真核基因表达调控的一种重要手段.利用转基因技术研究真核基因的表达,既可以在分子水平上设计实验,又能包括基因表达的诸多影响因素,从而能够进一步深入探讨基因的表达调控规律.该课题组先前发现了与Gγ-珠蛋白基因在成人期持续活跃表达相关的Yunnanese(Aγδβ)<0>-地中海贫血缺失突变体,并推测缺失可能导致增强子样顺序接近Gγ-珠蛋白基因,引起其在成人阶段的活跃表达.为证明这一假设,我们克隆了该突变体的缺失桥片段(YBg),该克隆包括Gγ珠蛋白基因及旁侧共6.7kb DNA以及11.5kb 3并入序列.利用报告基因系统,已在3并入顺序中鉴别到增强子活性.该文将3.1kbμLCR序列连接于缺失桥片段,构建了重组嗜菌体λLYBg.随后,分别将18kb的YBg及21kb的LCRYBg片段显微注射在小鼠受精卵中,目前共得到三只YBg片段阳性鼠及两只LCRYBg片段阳性鼠.还有一批注射了LCRYBg片段的仔鼠有待于进行鉴定.
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