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黄曲霉毒素(Aflatoxins, AFT)是一类能致癌、致畸、致突变的真菌毒素,其中黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1)的毒性最强,被世界卫生组织(WHO)列为一级致癌物。这类毒素广泛存在于花生、玉米等农作物中,不仅对人和动物的健康造成了严重的危害,也给我国的出口贸易带来了巨大的损失。本实验旨在筛选出能够高效、安全地吸附AFB1的益生菌菌株。本研究对硅胶柱层析、多功能净化柱和改进溶剂提取三种方法提取液态培养基中AFB1的回收率进行了比较,结果表明,在各AFB1添加量下,改进溶剂提取方法(正己烷脱脂,乙腈提取AFB1)的回收率均最高,最高可达99.14%。因此,最终确定应用改进溶剂提取方法(正己烷脱脂,乙腈提取AFB1)作为检测液态样品中AFB1浓度的前处理方法。研究了22株益生菌对培养基中AFB1的吸附能力,结果显示,14株菌能够吸附培养基中的AFB1,其中,活菌对培养基中AFB1的吸附率介于0-35.66%,经热灭活的菌体对AFB1的吸附能力介于8.57%-49.53%,表明热处理能够显著提高各菌株对AFB1的吸附能力。经100℃加热30min处理后,灭活的Y1对培养基中AFB1的吸附率最高,达49.53%,因此,在后续研究中,对Y1吸附AFB1的条件进行优化。本研究还通过复合物稳定性实验、扫描及透射电镜初步研究了Y1与AFB1的作用机理。复合物稳定性实验结果表明,Y1是通过物理方式与AFB1结合在一起的,且二者的结合是可逆的,甲醇、乙腈等溶剂能够提取出Y1-AFB1复合物中的AFB1。扫描和透射电镜观察结果表明,经100℃加热30min处理后,Y1表面由光滑变得凹凸不平,细胞壁厚度比加热前增加了148.73%,Y1细胞与AFB1的接触面积明显增大,从而导致Y1对AFB1的吸附能力明显增强。本研究首先确定了AFB1浓度为25ng/ml,菌体添加量2.5×109个/ml,并通过单因素实验研究了不同因素对Y1吸附培养基中AFB1的影响,最终确定了菌体处理方式为121℃高压灭菌30min,吸附时间60min,吸附温度23℃,转速200rpm。在上述条件下,Y1能够吸附培养基中84.17%的AFB1,培养基中AFB1浓度从25ng/ml降低到了4.38ng/ml。本文还比较了先加热(121℃高压灭菌30min)再冷藏及先冷藏再加热(121℃高压灭菌30min)这两种菌体保存方式对Y1吸附培养基中AFB1的影响,结果显示,若将离心获得的菌体先冷藏待使用前再加热处理,则24d天后Y1对培养基中的吸附能力与0天时无显著差异。在上述优化过的条件下,经一次吸附后培养基中AFB1浓度为4.38ng/ml,向此培养基中添加2.0×109个/ml的Y1菌体进行二次吸附,吸附条件与一次吸附相同,实验结果表明,经过二次吸附后,利用高效液相色谱方法检测不到培养基中的AFB1,这说明在一次吸附不能满足要求的情况下,采用二次吸附的方式可完全去除AFB1。研究了Y1对花生奶中AFB1的吸附效果,在AFB1浓度为25ng/ml、菌体添加量2.5×10~9个/ml、菌体处理方式为121℃高压灭菌30min、吸附时间60min、吸附温度23℃、转速200rpm的条件下,Y1能够吸附花生奶中88.32%的AFB1,花生奶中AFB1浓度从25ng/ml降低到了2.63ng/ml,且二次吸附后,应用高效液相色谱方法检测不到花生奶中的AFB1。