PTEN在细胞的生长、增殖、分化、凋亡和迁移等多种生命活动过程中起重要的调节作用。PTEN功能的异常可以引发多种肿瘤。PTEN蛋白依据其结构特点可分为氨基端的磷酸酶区域以及羧基端(CT)区域。PTEN的羧基端大约有50个氨基酸残基，其内含有两个PEST序列以及一个PDZ蛋白的结合基序，该区域对于维持PTEN的正常生理功能有非常重要的作用。已有研究发现，PDZ蛋白MAGI-2和MAGI-3可分别与PTEN蛋白羧基端结合而促进PTEN在细胞质膜的定位，并能增强PTEN蛋白的稳定性，从而更有效地抑制Akt的活性。此区域突变会影响PTEN蛋白的稳定性和亚细胞定位，并引起其磷酸酶活性的改变。PDZ蛋白的分布具有组织特异性，MAGI-2在脊髓和垂体高表达，MAGI-3主要在未分化组织中高表达，而PTEN蛋白分布广泛，在多种组织都有表达，因此仅研究MAGI-2和MAGI-3这两个PDZ蛋白无法解释PTEN在其他组织内是如何进行细胞内定位及其它多种功能的调节。并且至今仍不清楚哪一个或者哪些PDZ蛋白参与该过程。为此，本文利用PDZ蛋白质芯片筛选PTEN的结合蛋白。发现了几种新的与PTEN结合的PDZ蛋白。其中对PTEN/NHERF-1的相互作用进行了进一步研究。　　 NHERF-1是一种PDZ蛋白，它含有两个PDZ结构域。该结构域是一种非常重要的蛋白质—蛋白质相互作用的结构域。通过该结构域，NHERF-1可把其靶蛋白黏附或聚集在一起，形成信号转导复合物，从而调节细胞的代谢与生长过程。现有的研究表明NHERF-1与肿瘤的发生和发展有密切的关系，因此研究NHERF-1与PTEN的相互作用将有助于进一步阐明PTEN的抑癌机制和抑癌途径。　　 本实验对PTEN/NHERF-1的相互作用应用GST融合蛋白沉降和免疫共沉淀实验等多种方法予以进一步鉴定。发现PTEN的羧基端可与NHERF-1的第一个PDZ结构域(PDZ1)结合。将PTEN羧基最末端的4个氨基酸(I-T-K-V)中任何一个突变为丙氨酸，都能明显抑制PTEN与NHERF-1的结合。免疫共沉淀结果显示，在细胞内完整的蛋白质分子PTEN与NHERF-1也可以结合。由于PTEN的羧基末端与其稳定性有密切关系，并且MAGI-2和MAGI-3这两个PDZ蛋白家族的成员可分别与PTEN蛋白羧基端结合而增强PTEN蛋白的稳定性，为此本文也通过观察PTEN蛋白在细胞内的表达和降解情况，进一步研究了NHERF-1对PTEN蛋白表达和稳定性的影响，发现NHERF-1能增加细胞内PTEN蛋白的表达量，但它不增加PTEN的mRNA表达水平，并且能减慢PTEN蛋白的降解速度。另有研究发现：雌激素与其受体结合，通过迅速增强NHERF-1基因的转录，进而增加细胞内NHERF-1蛋白的表达水平；雌激素也可以使细胞内PTEN蛋白的表达增加，但其机制尚不清楚，为了观察NHERF-1是否参与了雌激素诱导的PTEN蛋白表达过程，通过RNAi技术下调细胞内NHERF-1蛋白的表达，然后观察雌激素诱导PTEN蛋白表达的情况。结果发现，NHERF-1蛋白缺失的情况下，雌激素不能再诱导PTEN蛋白的表达增加。　　 以上研究结果表明：PTEN与NHERF-1之间存在相互作用，该相互作用是由PTEN的羧基末端与NHERF-1的PDZ1结构域结合而实现的，PTEN羧基最末端的4个氨基酸对于维持它们之间的结合有十分重要的作用。NHERF-1通过与PTEN的结合增加PTEN的稳定性；NHERF-1参与雌激素诱导PTEN蛋白表达的过程，并且在其中起关键性作用。