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目的:1.通过不同剂量交泰丸对db/db小鼠的治疗作用比较,确定交泰丸降糖的较好剂量;2.通过交泰丸及其单味药黄连、肉桂对db/db2型糖尿病小鼠模型降糖作用的比较,拟证明具有中医配伍意义的交泰丸具有更显著的改善2型糖尿病糖代谢作用;3.通过形态学观察和交泰丸对db/db小鼠肌肉和脂肪中AMPK、p-AMPK和GULT4蛋白表达及肝脏AMPK、p-AMPK蛋白表达的影响观察,探索交泰丸降糖作用的部分机制。 方法:首先通过比较不同剂量交泰丸对db/db2型糖尿病小鼠的降血糖作用,对交泰丸的剂量做出选择:db/db小鼠分为模型组、交泰丸高剂量组、交泰丸低剂量组和罗格列酮组,另db/m小鼠分为正常对照组和正常加交泰丸低剂量组。药物灌胃治疗4周,对照组给予生理盐水。观察进食量、饮水量、尿量以及体重变化,观察FBG、IPGTT、血脂(TC、TG、HDL-c、LDL-c)、FINS和胰腺组织病理学的差异。选择较好降糖剂量的交泰丸进行交泰丸与单味药对db/db小鼠治疗作用比较及机制研究。db/db小鼠分为模型组、交泰丸组、黄连组、肉桂组、罗格列酮组,另db/m小鼠作为正常对照组。药物灌胃治疗4周,对照组给予生理盐水。观察进食量、饮水量、尿量以及体重变化,观察FBG、IPGTT、IPITT、血脂(TC、TG、HDL-c、LDL-c)和胰腺组织病理学的差异,取大腿肌肉和腹部脂肪,Western Blotting方法检测AMPK、p-AMPK及GLUT4的蛋白表达;取肝脏,Western Blotting方法检测AMPK、p-AMPK的蛋白表达。 结果:(1)db/db小鼠模型组均呈现肥胖、多饮、多食、多尿和高血糖症状,低剂量交泰丸(人的等效剂量)降糖作用不明显;高剂量交泰丸(4倍人等效剂量)有明显的降糖作用(p<0.05)。(2)与模型组比较,交泰丸组FPG降低(p<0.05),黄连和肉桂组血糖无明显差异;各给药组饮水量均减少(p<0.05),交泰丸与黄连组进食量减少(p<0.05);各给药组IPGTT较模型组改善,但交泰丸整方在IPGTT第30分钟时好于黄连组(p<0.05),在0、15、30、60、120分钟时好于肉桂组(p<0.05);交泰丸组IPITT改善(p<0.05)。(3)与模型组比较,交泰丸组(高剂量)胰岛形状较规则,外分泌腺浸润现象减少;胰岛内细胞数目较多,偶见空泡变性;胰岛周边部上皮样细胞增多,并向胰岛中央部移行;罗格列酮组仅见个别胰岛细胞肿胀,明显好于其他各组。(4)电镜结果显示,模型组胰岛β细胞破坏明显,胰岛被大量的α细胞所占据;交泰丸组虽胰岛细胞内分泌颗粒数量减少,但仍可见部分β细胞。(5)与模型组比较,交泰丸组免疫组化见胰岛中染色深的胰岛素阳性细胞数量增多;交泰丸组胰岛中的导管样细胞似表达insulin。(6)与模型组比较各给药组肝脏和脂肪组织中p-AMPK蛋白含量增加,肌肉和脂肪中GLUT4蛋白含量增加,但交泰丸较单味药增加更为明显(p<0.05)。 结论:(1)高剂量交泰丸(4倍人等效剂量)为降糖的较好有效剂量。(2)具有中医配伍意义的交泰丸较单味药能更显著的降低血糖,更好的改善2型糖尿病糖代谢紊乱的症状;(3)交泰丸有一定的保护胰岛细胞的作用,其降糖机制部分通过AMPK途径抑制肝脏糖异生,促进肌肉和脂肪组织葡萄糖摄取利用而发挥作用。