【摘 要】
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目的:建立纯度良好的视网膜神经节细胞（RGCs）培养模型检测大鼠出生后RGCs发育过程中的Jarid1b的表达变化;建立大鼠动物模型来观察视神经损伤后H3K4me3、Jarid1b的表达趋势,推测Jarid1b可能在视神经损伤后再生修复过程中发挥一定功能,为视神经损伤后的临床诊疗提供一定的基础依据。方法:首先选取出生6天（P6）的乳鼠,麻醉后取其眼球,解剖获得乳鼠视网膜组织,经消化、筛选及纯化制得
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目的:建立纯度良好的视网膜神经节细胞（RGCs）培养模型检测大鼠出生后RGCs发育过程中的Jarid1b的表达变化;建立大鼠动物模型来观察视神经损伤后H3K4me3、Jarid1b的表达趋势,推测Jarid1b可能在视神经损伤后再生修复过程中发挥一定功能,为视神经损伤后的临床诊疗提供一定的基础依据。方法:首先选取出生6天（P6）的乳鼠,麻醉后取其眼球,解剖获得乳鼠视网膜组织,经消化、筛选及纯化制得RGCs,将其悬浮后于24孔板中铺板,并通过免疫细胞化学方法鉴定其纯度。1.提取P6（出生6天）和成年大鼠的RGCs,并采用荧光定量PCR法检测Jarid1b的核酸表达水平的变化。2.选取清洁成年SD大鼠（n=45）损伤其左眼视神经以构建视神经损伤模型,右眼暴露视神经15秒以构建对照组模型。3.视神经损伤的第3天、第7天、第14天提取RGCs细胞、收集损伤组和对照组视神经组织制备组织切片;应用荧光定量PCR法检测损伤组和对照组中Jarid1b的核酸表达水平变化,应用免疫组化检测两组视神经中Jarid1b和H3K4me3的表达,并进行统计学分析。结果:1.光学显微镜下观察提取出的p6乳鼠RGCs,体外存活时间为7天左右,为后续细胞研究提供了基础。通过使用该培养方法筛选得出的RGCs阳性收益好,纯度较高,为进行RGCs相关的实验研究提供基础。2.通过qRT-PCR观察到Jarid1b的mRNA表达量在大鼠初生时随发育逐渐降低。3.视神经急性损伤后各时间点Jarid1b的表达均低于正常对照组,对照组Jarid1b表达无明显变化。4.视神经急性损伤后各时间点H3K4me3的表达均高于正常对照组。对照组H3K4me3的表达无明显变化。结论:1.该原代培养方法获得的大鼠RGCs阳性筛选效益较好。培养出的RGCs生长良好,纯度较高,初生6天乳鼠的RGCs体外存活时间可达7d,可以用于进一步的基础研究。2.Jarid1b在调控RGCs的发育、分化及凋亡等方面可能发挥着不同作用。3.视神经损伤后,H3K4me3及Jarid1b表达趋势提示:（1）Jarid1b与H3K4me3的表达变化在视神经损伤过程中关系密切;（2）推测Jarid1b表达变化是视神经损伤后抑制RGCs轴突再生的机制之一。
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