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研究目的1.收集TA2自发乳腺癌小鼠,观察其成瘤特点。2.探讨Wnt家族成员中Wnt1、Wnt10b、Wnt5a及Wnt5b在TA2小鼠乳腺癌发生过程中表达变化规律。3.在高转移TA2小鼠自发乳腺癌移植瘤模型中观察舒尼替尼对TA2小鼠自发乳腺癌的治疗效果。希望为人类三阴乳腺癌临床治疗提供新手段。研究方法1.收集TA2自发乳腺癌小鼠42只,记录其详细资料,包括出生日期,孕产次数,见瘤日期,处死并进行病理学鉴定。2.选取TA2小鼠自发乳腺癌组织及对侧未发瘤的乳腺组织(癌前病变),正常乳腺组织,处于孕早、中、晚各个时期TA2小鼠的乳腺组织,及经产TA2小鼠的乳腺组织,用real time PCR技术检测TA2小鼠乳腺癌发生过程中Wnt家族成员表达变化规律。3.选择6周龄的TA2雌鼠,建立高转移TA2小鼠自发乳腺癌移植瘤模型,待瘤体积达到0.2cm3,按瘤体体积大小分为两组,对照组给灭菌的去离子水,实验组给予抗肿瘤药物舒尼替尼(sunitinib),隔天测量瘤体体积,用药1周后,处死小鼠,收集移植瘤、内脏和股骨称重,4%福尔马林固定。根据瘤体积绘制肿瘤生长曲线,IHC检测给药组与对照组组织内细胞增殖标志物PCNA和血管标志物endomucin表达,观察抗肿瘤药物舒尼替尼对肿瘤的影响。研究结果1.本研究所收集的42只TA2自发乳腺癌小鼠,均为经产鼠。平均见瘤年龄为(336.706±85.05)天。平均分娩次数(3.767±1.79)次,其中分娩次数超过3次(包括3次)的荷瘤鼠占71.42%,分娩次数达7次为最多者,其平均见瘤年龄仅为251.5天,远远低于平均见瘤年龄。2. Real time PCR结果显示,妊娠期间,Wntl相对表达水平逐渐升高,产后相对表达水平高于正常；Wnt10b在妊娠早期相对表达水平升高,中期有所下降,妊娠后期又重新升高,产后有所降低,但仍高于正常水平；Wnt5a目对表达水平在妊娠期逐渐下降,产后低于正常水平。Wnt5b相对表达水平在妊娠过程中先升高后下降,产后,Wnt5b表达水平也高于正常。在TA2小鼠乳腺癌生成过程中,,Wnt1、Wnt10b、Wnt5a在癌前病变和乳腺癌组织中表达水平高于正常乳腺组织,而Wnt5b在乳腺癌组织中表达低于正常乳腺组织。3.药物实验结果显示实验组肿瘤生长速度显著低于对照组；此外,实验组乳腺癌移植瘤在肺、肝、脾、肾和腹腔转移率显著低于对照组；癌组织内坏死面积较大,PCNA阳性癌细胞数目显著低于对照组；与对照组相比,实验组MVD降低。结论1.本研究对42只自发乳腺癌TA2小鼠资料进行统计学分析发现,妊娠次数越多,乳腺癌发生的可能性越大,成瘤时间越短,与前期研究结果一致。2. Wnt1、Wnt5a、Wmt10b可能在TA2小鼠乳腺癌发生过程中起促进作用；妊娠期妊娠期雌、孕激素水平升高后,可能通过诱导MMTV转录,进而促进Wnt1(?)PWnt10b的活化。3.抗肿瘤药舒尼替尼能明显抑制TA2自发乳腺癌生长和转移,提示舒尼替尼有希望成为治疗三阴乳腺癌的特异性药物。