论文部分内容阅读
目的:
一氧化氮(NO)是机体细胞产生的一种具有强烈血管舒张作用的活性因子。它属于血管内皮衍生性舒张因子(EDRF)，其在心血管病方面的作用尤其突出，对于扩张冠状动脉，增加心肌供血起到重要作用。NO在体内产生主要有三种限速酶：神经元型(nNOS)、诱导型(iNOS)、内皮型(eNOS)。有研究表明，iNOS正常心肌中很少表达，在心脏缺血缺氧、心肌梗死后大量表达。其靶基因作用于血管内皮生长因子(VEGF)，促进血管发生，对缺血后血流再恢复及侧枝循环的建立起重要作用。其机制主要与缺血后儿茶酚胺、血管紧张素Ⅱ(ATⅡ)表达增多及多种炎症因子，如乳肿瘤坏死因子(TNF)等被激活有关。有报道显示高血糖可抑制内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的生成[4]，但对iNOS的作用未见报道。体内心肌梗死后NO主要以iNOS的表达为主，其水平更能反映梗死后心肌内NO的实际水平。我的实验通过建立心肌梗死模型，研究iNOS在正常心肌、糖尿病心肌及二者合并心肌梗死后的表达情况，并探讨其关系。
方法:
正常WISTER大鼠随即分为两组，假手术组(a组)及心肌梗死组(b)组，正常患糖尿病的GK大鼠随即分为两组，假手术组(c)组，及心肌梗死组(d)组。两心梗组给与体外开胸结扎左冠状动脉建立心肌梗死模型。4周后梗死组(b)、(d)组存活大鼠各取3只，假手术组(a)、(c)组各取3只计入统计。各组分别取心肌标本，做免疫组化染色，通过光镜观察细胞形态变化及测定细胞光密度值，比较梗死细胞与正常细胞的差别。用RT-PCR技术检测各组大鼠心肌iNOS mRNA的表达。结果采用统计学分析。
结果:
免疫组化结果显示： Wistar心梗组与GK心梗组在缺血坏死区可见到心肌细胞iNOS大量阳性染色，光镜下可见深棕色染色，分布于心肌细胞胞浆及胞核中(图1b、1d)，而且GK心梗组与Wistar心梗组相比，iNOS阳性染色减少，二者光密度测定值有差异(P<0.05)。在Wistar大鼠心肌中，Wistar假手术组未见明显阳性染色(图1a)，与Wistar心梗组相比，光密度测定值差异更具显著性(P<0.01)。在GK糖尿病大鼠中，GK假手术组未见明显阳性表达(图1c)，与GK心梗组相比，差异具有显著性(P<0.05)。GK假手术组与Wistar假手术组相比，二者光密度测定值未见明显差异(P>0.05)．iNOSmRNA表达：在Wistar大鼠中，与Wistar假手术组相比，Wistar心梗组iNOSmRNA表达明显增加(P<0.01)。而在GK糖尿病大鼠中，与GK假手术组相比，GK心梗组iNOSmRNA表达增加(P<0.05)，并且GK心梗组与Wistar心梗组相比，GK心梗组iNOSmRNA表达减少，二者之间差异显著(△P<0.05)。 GK假手术组与Wistar假手术组相比，二者iNOSmRNA表达未见明显差异(P>0.05)。
结论:在正常鼠心肌细胞内，诱生型一氧化氮合酶很少表达。糖尿病对正常鼠心肌细胞iNOS的表达无明显促进及抑制作用。心肌梗死可以明显促进正常鼠及糖尿病鼠心肌细胞内iNOS的表达。心肌梗死后高血糖可明显抑制iNOS的表达，使体内NO生成减少，不利有梗死后血供的恢复。