目的：建立适合大规模生产化的重组人干扰素α2b(rhα2b)制造新工艺,为国内外患者提供质优价廉的重组人干扰素注射液。 方法：干扰素是一类具有多种生物活性的细胞因子,具有显著调节机体免疫功能、抗病毒、抗肿瘤等多种作用,在临床应用已有40多年。重组人干扰素α2b是一种广谱抗病毒、抗肿瘤和调节机体免疫功能的药物。用于治疗乙型肝炎、带状疱疹、尖锐湿疣和某些白血病、恶性肿瘤等疾病。目前,这一制品国内许多厂家相继开发投产,但成本高、而且因操作复杂,生产周期长而不适于大规模生产。 通过优化IFN α2b的发酵工艺和对各种色谱分离及提纯技术的比较,建立一套基因工程干扰素α2b大规模生产工艺,用40L发酵罐(美国NBS)培养的工程菌SDS-PAGE表达量超过30％。目标蛋白以包涵体的形式存在于菌体内。包涵体破菌分离后,经变性、复性,用离子交换层析、疏水层析、凝胶过滤层析进行纯化,终产物为IFNα2b,其检定项目均符合生物制品检定规程的要求。 结果：建立了重组人干扰素α2b制造新工艺,用重组人干扰素α2b制造新工艺生产的rhα2b纯度达到99％以上,比活为1.5×108IU/mg以上,分子量为18100左右,等电点为4.0-6.7。 结论：该制造新工艺操作简便、重复性好、产品质量高,单批产量大,适合大规模生产。