【摘 要】
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目的:探讨体外实验中,抑制性寡脱氧核苷酸(Sup ODN)对小鼠脾脏CD4+T细胞转录因子T-bet、STAT4及STAT6表达的影响。方法:分离小鼠脾脏淋巴细胞,免疫磁珠阳选法纯化CD4+T细胞,流
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目的:探讨体外实验中,抑制性寡脱氧核苷酸(Sup ODN)对小鼠脾脏CD4+T细胞转录因子T-bet、STAT4及STAT6表达的影响。方法:分离小鼠脾脏淋巴细胞,免疫磁珠阳选法纯化CD4+T细胞,流式细胞仪分析分选纯度,在抗-CD3ε抗体、抗-CD28抗体、IL-12作用下,加入Sup ODN或对照寡脱氧核苷酸(Con ODN)培养72小时后,常规提取核蛋白。Western-blot测定核蛋白中磷酸化的磷酸化信号转导子和转录激动子4(Phosphorylationsignal transducers and ctivators of transcription 4,STAT4)、磷酸化信号转导子和转录激动子6 (Phosphorylationsignal transducers and ctivators of transcription 6,STAT6)和T细胞表达的T盒(T box expressed in T cells, T-bet)蛋白表达。结果:与Con ODN组和PBS组相比,Sup ODN组中T-bet和pSTAT4的表达水平明显降低(p<0.05),而pSTAT6表达水平明显升高(p<0.05)。结论:Sup ODN可能通过下调pSTAT4和T-bet的表达,体外抑制小鼠CD4+T细胞向Thl细胞的功能性分化,上调pSTAT6的表达,促进Th2细胞的分化。
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