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为了研究附红细胞体在体外生长变化的规律，为附红细胞体的体外培养提供依据，在羊附红细胞体感染的血液中分别加入三种抗凝剂，试找出对羊附红细胞体（Epervthrozoon ovis）体外生长影响最大的一种抗凝剂。结果表明，柠檬酸钠溶液能使附红细胞体在体外血液中维持一定的数量。在柠檬酸钠溶液中加入葡萄糖和NaHCO3，研究了营养成分的添加对羊附红细胞体的影响。结果表明，在抗凝剂中添加葡萄糖和NaHCO3能显著地提高附红细胞体的数量。故在其后的试验中，采用添加葡萄糖和NaHCO3的柠檬酸钠溶液作为抗凝剂。根据附红细胞体在离体后12h内保持增殖活性的特性，血样必须在采后12h内处理。 2002年1月～2002年12月，用镜检法对羊附红细胞体病的流行病学进行了调查。对附红细胞体的流行病学调查表明，附红细胞体对羊的感染率有一定的季节性，与吸血昆虫有一定的关系。寒冷季节，附红细胞体的感染率非常低，温暖潮湿的春夏季节，感染率呈上升趋势，在炎热的季节，附红细胞体的感染率非常高，常常达到80％以上。 对附红细胞体进行分子水平上的研究始见于20世纪80年代，随着基因工程技术的迅猛发展，对该病的研究也逐渐深入到分子水平上。本试验根据羊附红细胞体的16S rRNA基因参考序列的保守区，设计一对特异性引物（p1／p2），对羊附红细胞体基因组DNA进行了PCR检测，扩增出一段1000多bp的DNA序列，用EcoRI酶切，得到两条500bp以上的条带，与预期结果一致，说明PCR方法扩增出了羊附红细胞体的特异条带。并经交叉性和灵敏性试验证明，该方法特异、灵敏、快速，可从分子水平上对附红细胞体病进行早期快速诊断和流行病学调查，是一种理想的精确检测该病的方法，能及时掌握该病的流行情况并迅速准确地对可疑病例作出诊断，杜绝该病的大规模爆发，对控制该病的大范围流行具有重要意义。 附红细胞体病的诊断一直以来都是以镜检法作为标准，然而由于附红细胞体个体很小，镜检法有一定缺陷，并且缺乏特异性，故寻求一种快速、特异的诊断方法就成了当务之急。本试验利用血清学技术，摸索了酶联免疫吸附试验（ELISA）的最佳工作条件。自行采集血液，提纯抗原，用常规方法免疫家兔，制备阳性血清，进行酶联免疫吸附试验，并与镜检法作比较，证明ELISA作为诊断羊附红细胞体病的一种方法具有特异、灵敏、快速、高效的优点。以辣根过氧化物酶（HRP）标记的羊抗兔抗体为酶标二抗，最佳工作条件为抗原稀释度64倍、阳性血清稀释度160倍、酶标二抗稀释度1000倍，一抗和二抗的最佳反应时间为1h。对羊附红细胞体的最小检出量为50.30μg／ml。与支原体、大肠杆菌、葡萄球菌无交叉反应，证明该方法具有良好的特异性。ELISA方法适合于大规模养殖场对附红细胞体病的调查，从整体水平上把握该病的流行情况，为控制该病的传播提供依据。