Linomide(roquinimex，LS2616)是由瑞典AB LEO制药公司开发一种Th1/Th2平衡调节剂，对多种自身免疫病的动物模型均有较好的治疗作用。Linomide在美国作为治疗多发性硬化症的在研新药(investigational new drug，IND)曾进入Ⅲ期临床试验，但由于发现较为严重的心脏毒性被提前终止。但是，多家实验室仍在对linomide进行结构改造以期发现高效低毒的新型免疫调节剂。本实验室亦与化学合成实验室合作，由恽榴红研究员领导的研究小组负责linomide的结构改造、样品合成，得到一系列4-羟基喹啉-3-羧酰胺类似物，并对所获得化合物进行免疫活性筛选和评价。 一、4-羟基喹啉-3-羧酰胺类似物的活性筛选 针对linomide的作用特点，并考虑到其毒性因素，首先采用小鼠淋巴细胞增殖反应在体外对linomide类似物进行免疫活性初筛。Linomide类似物共计接入124个，由于溶解度的原因，共对其中86个化合物进行了免疫活性初筛。结果表明，86个化合物中有38个作用与linomide相似，体外应用具有免疫抑制活性。进而，采用MTT法对上述38个化合物对小鼠脾淋巴细胞的毒性作用进行了初筛。结果表明，H1521、H0418、H0215、H1619、H0216、H1921、H0715等七个化合物在1～100μg/ml浓度范围内对小鼠脾淋巴细胞无明显毒性作用或毒性低于linomide o在此基础上，进一步观察了H1521等七个化合物对小鼠迟发性超敏反应(delayed typehypersensitivity，DTH)的影响。结果表明，化合物H1521和H0418的作用与linomide相似，明显增强小鼠DTH；化合物H0215、H0216、H1619和H0715对小鼠DTH则无明显影响。同时，检测了小鼠脾细胞培养上清Th1/Th2细胞因子的水平，结果表明，H1521和H0418能显著增加Th1细胞因子IFN-γ分泌，对Th2细胞因子IL-4分泌无明显影响，提示H1521和H0418能调节Th1/Th2平衡，具有较好的开发前景。因此，在后续的实验中，我们选择化合物H1521，对其抗自身免疫性肾炎的活性进行了评价，并对其作用机理进行了初步探讨。 二、H1521对小鼠实验性自身免疫性肾炎的疗效评价 本研究选用的小鼠自身免疫性肾炎模型是一种慢性移植物抗宿主病(chronicgraft-versus-host disease，cGVHD)病理模型，该模型具有与人类SLE相似的病理生理学变化和临床表现，如Th1/Th2细胞失衡，B细胞异常活化产生自身抗体，免疫复合物沉积介导血管球性肾炎，因此常被用于自身免疫性肾炎发病机理、防治药物及药物作用机理的研究。 三、H1521对自身免疫性肾炎小鼠治疗作用的机理研究 在确定H1521对小鼠自身免疫性肾炎疗效的基础上，针对肾炎发生发展的主要病理生理学环节及关键分子，观察了H1521对Th1/Th2细胞平衡、B细胞活化、巨噬细胞活化、性激素水平等方面的影响，旨在探讨H1521防治自身免疫性。肾炎的作用机理。