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多酚,尤其是亲水性多酚是中药的重要药效成分,其分子结构较复杂,含有较多的酚羟基和糖苷。传统分离方法步骤繁琐,往往导致这类强极性化合物出现降解和不可逆吸附现象,不能达到理想的分离效果。探索新方法分离新化合物,实现高纯度和高收率分离,简化工艺,降低成本,是亲水性多酚研究的重点问题。本文针对亲水性多酚分离纯化困难的问题,建立了具有新颖性和普适性的亲水性多酚分离纯化技术平台,包括液／液两相高速逆流色谱和液／固两相琼脂糖凝胶氢键吸附色谱分离体系,并初步探讨了三相高速逆流色谱的建立。1.重点研究了具有普适性的高速逆流色谱分离纯化天然产物的流程,改进了原有溶剂体系的构建和优化方法；创造性地提出双转向洗脱方法,将正相色谱和反相色谱概念引入高速逆流色谱。以二羟基苯甲酸同分异构体混合物、丹参多酚和老鹳草多酚为模式物,建立了具有新颖性和普适性的高速逆流色谱分离纯化亲水性多酚的方法。应用高速逆流色谱成功分离了小分子多酚类化合物同分异构体——5种二羟基苯甲酸；从丹参粗样中成功制备纯度99.4%的丹参酚酸B100 mg,收率达85.5%；首次利用高速逆流色谱法成功分离了老鹳草中的亲水性多酚没食子酸、柯里拉京和老鹳草素,纯度分别为85.9%,92.1%和94.2%,收率分别为88.1%,70.3%和92.2%。建立了高速离心力场下的液／液／固三相高速逆流色谱体系。通过优化体系运行参数,实现了较高的固定相保留,成功分离了二苯基色原酮、槲皮素和杨梅素及芦丁和槲皮素苷强极性多酚类化合物混合物。2.建立了高浓度、高交联度琼脂糖凝胶介质Superose Prototype(氢键受体型)和Tris-NovaroseTM ACTHigh(供体型)氢键吸附色谱分离亲水性多酚方法,明确了分离及调控机理,为后续的规模化分离及介质修饰奠定了基础。以环境友好的乙醇：乙酸：水作为流动相,采用分辨率较高的梯度洗脱模式,利用Superose Prototype介质成功分离了多种高纯度亲水性多酚类化合物：从丹参粗样中一步分离制备获得丹参素、原儿茶醛和丹参酚酸B,纯度分别为：98.1%、99.2%和94.3%,收率分别为：94.3%、98.2%和94.1%。Superose Prototype介质载样量高,当丹参粗样上样量达到1／4柱体积,即15 mL(600 mg)时,其纯度和收率分别为84.9%和78.3%；首次利用琼脂糖凝胶氢键吸附色谱从老鹳草粗制样品中一步纯化获得没食子酸、柯里拉京和老鹳草素,纯度分别为：90.4%、90.2%和84.3%,收率分别为：82.0%、87.0%和77.1%。