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目的:(1)探讨单用Buformin对人宫颈癌细胞的增殖及侵袭的抑制作用及其机制。(2)探讨单用Buformin对人宫颈癌细胞葡萄糖摄取及ATP产生的影响。(3)探讨Buformin联合临床一线宫颈癌化疗药对人宫颈癌细胞的协同抑制作用。(4)探讨单用Buformin及联合化疗药紫杉醇对裸鼠人宫颈癌细胞移植瘤的增殖抑制作用。方法:(1)CCK-8法及克隆形成实验检测递增浓度的Buformin对人宫颈癌细胞Hela、Siha、C33A和HCC94增殖能力的影响,绘制生长曲线,计算半数抑制浓度IC50值;(2)Transwell细胞体外侵袭实验检测Buformin对人宫颈癌细胞Siha和C33A侵袭的影响,并检测侵袭相关蛋白MMP9的表达情况;(3)流式细胞分选技术检测Buformin对人宫颈癌细胞Siha、C33A和HCC94的凋亡及细胞周期的影响;(4)分别检测Buformin对人宫颈癌细胞Siha、C33A和HCC94细胞内葡萄糖摄取、LDH活性、乳酸产生及ATP生成情况的影响;(5)Western-blot检测Buformin处理后对人宫颈癌细胞内AMPK磷酸化激活情况及AMPK/mTOR通路下游关键蛋白S6的表达情况的影响;(6)CCK-8法检测Buformin与宫颈癌一线化疗药物(顺铂、紫杉醇、5-氟尿嘧啶)联用对人宫颈癌细胞Siha、C33A和HCC94的增殖抑制情况,计算联合指数CI,判断其协同效应;(7)构建Siha细胞雌性裸鼠皮下移植瘤模型,分别观测Buformin单用、紫杉醇单用、Buformin+紫杉醇联用对肿瘤生长抑制的情况以及全身毒副作用的发生与否。结果:(1)Buformin对人宫颈癌细胞Hela、Siha、C33A、HCC94有浓度依赖性的增殖抑制作用,且显著抑制Siha、C33A、HCC94的克隆形成能力。(2)Buformin对人宫颈癌细胞Siha、C33A的侵袭行为有抑制作用,伴随细胞内蛋白MMP9表达量下降。(3)流式分析结果提示10μM、100μM和200μM的Buformin仅仅引起少量的C33A细胞凋亡,而对Siha、C33A、HCC94细胞都存在诱导细胞G1期阻滞。(4)Buformin以剂量依赖性的方式显著提高了人宫颈癌细胞株Siha、C33A、HCC94的葡萄糖摄取。此外,细胞内LDH的活性增加、乳酸产生增多、ATP的产生急剧下降。(5)Buformin以剂量依赖性的方式激活AMPK,使之磷酸化增加,而显著抑制mTOR通路下游分子S6的活化。(6)Buformin增加了化疗药紫杉醇、顺铂、5-氟尿嘧啶的化疗敏感性,与化疗药存在协同抑瘤的作用。(7)Buformin抑制人宫颈癌细胞移植瘤的生长,且联合紫杉醇对移植瘤增殖抑制效果更显著;使用Buformin组的瘤体内乳酸水平和LDH活性均显著上升,但对血糖及肝肾功能并无太大影响;与对照相比,Buformin和紫杉醇治疗的肿瘤中,增殖相关标记物Ki-67的表达降低,联合治疗组表达量更低;AMPK磷酸化的水平在Buformin和联合治疗组的癌组织中表达上调,而对照组或紫杉醇组未发生明显的变化。结论:Buformin在体内及体外实验均表现出抑制宫颈癌生长和侵袭的效果,且和宫颈癌临床一线化疗药有协同抗肿瘤作用,因此,Buformin可能成为宫颈癌抗癌的新选择。