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目的:研究小剂量IL-2预孵育移植物后对小鼠急性GVHD的影响,探讨小剂量IL-2预孵育后同种异基因淋巴细胞中SOCS-3蛋白表达的变化在此过程中的作用与机制。方法:1、用IL-2预孵育DO11.10转基因小鼠naive T淋巴细胞、C57BL/6N小鼠脾细胞和C57BL/6N小鼠na（?）veCD4+T细胞,检测SOCS-3基因的表达变化。用OVA323-329特异性抗原刺激活化DO11.10TCR转基因小鼠T细胞,检测T淋巴细胞经抗原活化后SOCS-3基因的表达变化。2、构建pLX-SOCS3-SN载体,建立高表达SOCS-3基因的DO11.10细胞（DS细胞）,用OVA323-329特异性抗原刺激活化DS细胞,检测DS细胞的免疫应答能力。3、用IL-2（50U/ml）预孵育DO11.10 TCR转基因小鼠na（?）ve T淋巴细胞、C57BL/6N小鼠脾细胞和C57BL/6N小鼠na（?）ve CD4+T细胞,然后用OVA323-329特异性抗原和BALB/C小鼠异基因抗原分别对其进行刺激,测定DO11.10 TCR转基因小鼠na（?）ve T淋巴细胞、C57BL/6N小鼠脾细胞和C57BL/6N小鼠na（?）ve CD4+T淋巴细胞免疫增殖能力。4、以C57BL/6N小鼠的T淋巴细胞为反应细胞,以BALB/C小鼠灭活的脾细胞为刺激细胞。将反应细胞在终浓度为50U/ml的IL-2中预孵育4小时,然后与刺激细胞在细胞因子IL-12或者IL-4存在的情况下进行混合淋巴细胞反应。与对照组（即反应细胞不给予IL-2预孵育4小时）比较第14天时IL-12Rβ1、IL-12Rβ2和胞内IFN-γ和IL-4的表达的差异,进行统计学检验。5、受鼠为雌性BALB/C,预处理为137Se TBI 5GY,分为A、B、C、D、E共5组（n=12）,分别过继性植入雄性C57BL/6N脾淋巴细胞5×107、1××107和雄性BALB/C×C57BL/6N→F1脾淋巴细胞0.5×107、1×107、5×107（个/只）。对存活时间超过21天的受鼠在不同时间点用PCR检测供者淋巴细胞嵌合体,观察受鼠生存时间和急性GVHD的症状。6、受鼠为雌性BALB/C,预处理为137Se TBI 5GY,供鼠为雄性C57BL/6N。每只受鼠均腹腔注射供鼠脾淋巴细胞3×107个,受鼠分为A（直接植入供鼠淋巴细胞）、B（植入的淋巴细胞经过终浓度为50 U/ml的IL-2预孵育4小时）、C（植入的淋巴细胞先与灭活的BALB/C脾淋巴细胞反应72小时再植入）、D （植入的淋巴细胞先经过终浓度为50 U/ml的IL-2预孵育4小时,然后与灭活的BALB/C脾淋巴细胞混合淋巴细胞反应72小时再植入）共4组（n=9）。观察期为60天,观察受鼠生存时间和急性GVHD的症状,死亡受鼠均行肝脏和小肠的病理检查了解急性GVHD的病理改变情况。观察期结束时取每只小鼠脾细胞检测嵌合体,取肝脏和小肠行病理检查,了解急性GVHD的病理改变。结果:1、DO11.10 TCR转基因小鼠na（?）ve T淋巴细胞、C57BL/6N小鼠脾细胞和C57BL/6小鼠na（?）ve CD4+T淋巴细胞经IL-2预孵育后,SOCS-3的表达明显升高,在4-6小时达到高峰。DO11.10 TCR转基因小鼠T细胞经OVA323-329特异性抗原刺激后SOCS-3的表达明显降低,以2-3天最低。2、高表达SOCS-3的DS细胞对OVA323-329特异性抗原免疫应答能力明显减弱。3、DO11.10转基因小鼠na（?）ve T淋巴细胞、C57BL/6N小鼠脾细胞和C57BL/6N小鼠na（?）ve CD4+T淋巴细胞经IL-2预孵育后对OVA323-329特异性抗原和同种异基因抗原免疫增殖能力明显减弱。4、经IL-2预孵育后的CD4+T淋巴细胞,接受异基因抗原刺激的同时加入外源性IL-12培养,第14天时,IL-12Rβ1、IL-12Rβ2的表达虽然呈阳性,但是明显低于未经预孵育组（P值<0.05）,IFN-γ与IL-4阳性率的比值也低于未经预孵育组（P<0.05）。加入外源性IL-4培养时,经IL-2预孵育组IL-12Rβ1、IL-12Rβ2的表达也明显明低于未经预孵育组（P<0.05）,IL-4的表达明显要高于未经预孵育组（P<0.05）。5、TBI为5GY的免疫抑制后,在受鼠保留自身造血的情况下,过继性同种异基因淋巴细胞可以植活。MHC分子半相合的植活率（D组）比完全不相合的（B组）高,植活时间长（P<0.01）;在半相合的植入模型中植入的细胞量越多,植活率越高,植活时间逐渐延长（P<0.05）。同时仍有急性GVHD发生,MHC完全不相合（A组）移植小鼠可发生致死性急性GVHD,半相合（E组）急性GVHD明显减轻（P<0.01）。6、IL-2（50 U/ml）预孵育同种异基因淋巴细胞4小时后,然后与灭活后的BALB/C脾淋巴细胞混合反应72小时,再过继性植入后其急性GVHD的发生强度明显减轻。结论:小剂量的IL-2预孵育同种异基因的淋巴细胞后,可以明显减轻过继性植入后急性GVHD的发生。其机制与小剂量IL-2预孵育异基因淋巴细胞上调SOCS-3的表达后,抑制其增殖反应和阻滞Th0细胞接触同种抗原后向Th1方向的分化有关。