不同阶段染矽尘大鼠血清硅元素水平变化及与胶原关系的研究

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目的矽肺是尘肺中最为常见的一种类型,在我国属于法定职业病。卫生部公布建国以来至2008年底,职业病累计报告共704,602例,其中累计报告的尘肺病病例达638,234例;而2008年尘肺病新增病例10,829例,其中死亡病例613例,晋期病例811例,在10,829例尘肺病新病例中,煤工尘肺(coal workers pneumoconiosis,CWP)和矽肺占89.32%。报告指出我国是尘肺大国,尘肺病人数、接触粉尘作业人数都居世界首位;职业病危害形势严峻,尘肺病发病居高不下,群发性尘肺病时有发生,并且停止粉尘暴露,尘肺病依然进展;高浓度暴露,发病工龄缩短,发病年龄趋于年轻化,病情严重,死亡率高。矽肺患病率逐年增多,造成巨大的直接和间接经济损失和沉重的社会负担。目前对矽肺病人和暴露人群尚无有效的早期诊断(筛检)和有效的健康监护方法。一经传统的胸片确诊,病人肺部纤维化进程已无药物可逆转。因此寻找用于矽肺早期诊断和肺纤维化进程评价的生物标志物已成为矽肺病研究中迫切需要解决的问题。近几年国内外不少学者为寻找矽肺早期诊断(筛检)生物标志物作了不懈努力,但这些研究基本上仍停留在实验室阶段,其预测矽肺发生和筛选矽肺易感者的有效性和可行性,仍需相当时日的验证。本研究应用原子吸收分光光度间接检测法测定大鼠矽肺模型血清硅元素水平并与肺组织中的Ⅰ、Ⅲ型胶原进行比较,探讨血清硅元素水平在矽肺早期诊断中的意义和价值。方法1.采用随机数字表将80只大鼠分为2个实验组,即对照组、染矽尘组。每组均分为5个时间点为1d、7d、14d、21d、28d,各组每个时间点均随机分配8只大鼠。采用气管暴露法造模,以气管灌注生理盐水的大鼠作为对照组;气管灌注二氧化硅悬液1ml(50mg/ml)为染矽尘组。模型建立后1d、7d、14d、21d和28d的5个时间点分别取8只大鼠处死,并将肺组织迅速投入液氮待用。2.采用火焰原子吸收分光光度间接法检测染矽尘大鼠血清中的硅含量。在硅钼杂多酸中,钼与硅的克原子数之比12 : 1 (钼与硅重量比40 : 1),利用杂多酸的“化学放大效应”,硅能与钼酸盐形成二元杂多酸,萃取后,测定有机相中的钼的吸光度(A)可间接测定硅元素的含量。3.取每只大鼠右下肺最大横径处肺组织用于石蜡包埋切片。采用HE染色和天狼猩红染色法,分别观察矽结节和Ⅰ、Ⅲ型胶原。4.所有数据均用x±s表示,采用SPSS 16.0 for windows分析软件进行分析,α=0.05。结果1. HE染色结果和天狼猩红染色结果均显示大鼠矽肺模型是成功的。2.矽肺模型大鼠染尘后1d、7d、14d、21d和28d,硅元素水平明显增高,其含量水平亦显著高于对照组,差异有显著性(P<0.05)。3.矽肺模型大鼠肺组织Ⅰ型胶原在染矽尘后的7d、14d、21d和28d时,显著高于对照组,差异有显著性(P<0.05)。4.矽肺模型大鼠肺组织Ⅲ型胶原在染矽尘后的14d、21d和28d时,显著高于对照组,差异有显著性(P<0.05)。5.矽肺模型大鼠染尘后1d硅元素水平即开始升高,呈现一个不断增高的趋势,其变化明显早于Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达;随着血硅的升高,Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原逐渐升高。结论染矽尘大鼠血清硅元素含量升高在染尘后1d即可出现,其升高改变早于Ⅰ、Ⅲ型胶原的变化,血清硅元素水平升高可能对矽肺的早期诊断具有一定的意义。
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