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研究目的：白内障是一致盲眼病,氧化损伤是诱发白内障的重要因素。褪黑素(MLT)是松果体分泌的一种吲哚类激素,是人体内强有效的自由基清除剂及抗氧化剂。本课题应用褪黑素作用于离体氧化损伤的大鼠晶状体,通过体外抗氧化模型实验,检测其抗氧化能力,探讨褪黑素对过氧化氢诱导大鼠白内障形成的抑制作用,为寻求较为理想的抗氧化药物提供理论依据。研究方法：体外取出发育正常的Wistar大鼠晶状体,按随机原则分为以下三组：A组为空白对照组,B组为过氧化氢(H2O2)处理组,C组为在B组的基础上加入不同浓度的MLT,使MLT终浓度分别为10(C1组)、30(C2组)、50(C3组)、100(C4组)、200(C5组)μmol／L。体外培养24h后,观察各组晶状体的混浊程度,采用Image-ProPlus(IPP)6.0软件分析晶状体下黑色条带的平均光密度值；酶标仪测定各组晶状体组织的蛋白含量、还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)含量。行HE染色倒置显微镜下观察各组晶状体上皮细胞的形态。研究结果：1.大鼠晶状体混浊程度的观察及定量分析培养结束后,裂隙灯下可见,A组晶状体保持透明,晶状体后灰线清晰可见；B组晶状体全混呈白色,晶状体后灰线模糊不清；C组晶状体的透明性均高于B组,晶状体后灰线呈不同程度的模糊。平均光密度值分析,C组晶状体平均光密度值高于B组(P<0.05)。C组结果显示,C3组与C4组平均光密度值较高,晶状体透明性较高,组间差异无统计学意义(P>0.05),其它各组间平均光密度值差异均有统计学意义(P<0.05)。2.大鼠晶状体生化指标的测定培养结束后,C组大鼠晶状体组织中的GSH、T-AOC、SOD、CAT含量高于B组(P<0.05),在C组中,C3组大鼠晶状体组织中的GSH、T-AOC、CAT活性最高(P<0.05), C3组与C4组SOD含量差异无统计学意义(P>0.05)。C组大鼠晶状体组织中MDA含量低于B组(P<0.05),而C3、C4、C5组组间MDA含量差异无统计学意义(P>0.05)。3.光镜下各组晶状体组织的细胞形态学观察HE染色后,光镜下可见,空白对照组晶状体前囊膜连续光滑,晶状体上皮细胞线状排列,核呈长杆状,晶状体皮质纤维层排列规整。H202处理组晶状体前囊膜不连续,晶状体上皮细胞有增殖,排列紊乱,部分晶状体上皮细胞向深层组织移行,细胞体积变大,胞核多形。MLT10μmol／L组晶状体前囊膜完整,晶状体上皮细胞增殖,形态呈长杆状,排列呈多层,多位于较深层次；MLT30μmol/L组部分晶状体上皮细胞增殖,失去原来整齐的单层排列,出现拥挤现象,晶状体皮质纤维层排列规整；MLT50μmol／L组晶状体上皮细胞线状排列,间隙较一致,胞核呈长杆状,形态较一致。随着MLT浓度的增加,可见晶状体上皮细胞线状排列,间隙较一致,少量细胞位于较深层,晶状体皮质纤维层排列紧密而规整,但是MLT100μmol／L组有囊泡形成。研究结论：在H202存在的条件下,未加入MLT,大鼠晶状体全混呈白色。在H2O2存在的条件下,加入MLT,大鼠晶状体的透明度明显高于H2O2处理组。MLT及其被氧化后的多级代谢产物具有较强的抗氧化作用,抵抗H2O2对晶状体的氧化损伤。本实验中加入MLT体外培养的大鼠晶状体GSH、T-AOC、SOD及CAT含量高于H2O2处理组,而MDA含量低于H2O2处理组,说明MLT组抗氧化能力提高。在加入MLT各组间,从MLT 10μmol/L至MLT50μmol/L,随着浓度的增加,其抗氧化能力越强,MLT在浓度为50μmol/L时即能发挥有效作用。光镜下观察大鼠晶状体上皮细胞的形态,H2O2处理组晶状体前囊膜不完整,晶状体上皮细胞排列紊乱,呈多层,细胞间隙增大,胞核多形；而MLT组上皮细胞破坏程度比H2O2处理组轻,MLT50μmol/L组晶状体上皮细胞呈单层线状排列,细胞间隙较一致,胞核呈长杆状,形态更接近空白对照组,这些实验结果说明MLT可提高氧化损伤晶状体的抗氧化能力,发挥了很强的保护晶状体、维持晶状体透明性的作用。