第一部分核受体FXR对RECK的转录调控机制研究法尼酯X受体(farnesoid X receptor,FXR)是配体激活的转录因子,它是核受体超家族成员之一。FXR高表达于肝脏、小肠、肾和肾上腺等组织,脂肪和心脏也有少量表达。FXR能以单体形式或与RXR形成异二聚体结合到一系列靶基因的反应元件区(FXRE)上,从而发挥转录调控作用。FXR广泛参与体内的代谢过程,如胆汁酸代谢、糖代谢、脂代谢等,此外,FXR在抗炎症、抗纤维化、抗肿瘤方面也有一定的作用。RECK (reversion-inducing cysteine rich protein with Kazal motifs)是一种新发现的膜锚定蛋白,它能在转录后水平调控多种基质金属蛋白酶(Matrix metalloproteinases, MMPs)的活性,而MMPs广泛参与细胞外基质重塑和降解过程。除了参与肿瘤的侵袭和转移,MMPs和其抑制剂TIMPs也在慢性炎症及肝纤维化的进展中发挥作用。我们发现,活化的FXR能在体内和体外直接调控RECK的表达。通过荧光素酶报告基因活性测定和染色质免疫沉淀(ChIP),我们鉴定出位于RECK基因第一个内含子内的FXRE。FXR激动剂能逆转炎症反应中的RECK水平下调,用其处理蛋氨酸胆碱缺乏饮食(MCD)诱导的慢性炎症及肝纤维化小鼠模型,我们观察到FXR激动剂有助于抑制过高的MMP-9活性,推测这可能与活化FXR诱导表达的RECK有关。因此FXR激动剂可能通过诱导RECK发挥抗炎症的功能。第二部分核受体FXR在肝癌中的作用研究原发性肝癌是一种常见的恶性肿瘤,发病率和死亡率均居癌症前列,肝细胞性肝癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)是其中最常见的。肝癌的发病机制十分复杂,其发生、发展、转移和复发都是多基因参与、多因素影响、多阶段发展的复杂网络调控过程。核受体是一类配体依赖的转录调控因子,法尼酯X受体(FXR)是其中一个成员。FXR主要表达在胆汁水平较高的组织如肝脏、小肠等,它通过调控下游靶基因的表达参与调节胆汁酸代谢、糖代谢和脂代谢。FXR缺失小鼠自发形成肝癌,更加容易产生化学诱导的肠癌,提示FXR在消化系统中可能是抑癌基因。FXR活化后能抑制肝癌细胞的增殖,促进凋亡。本课题中,我们发现FXR激活后能够促进抑癌基因p18和RECK的表达,但具体的作用机制还有待深入探索。以FXR作为新型的干预和治疗靶点,研究FXR激动剂在HCC发生发展过程中的药理学机制将具有重要的理论指导和临床应用意义。