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目的 研究右旋柠烯(d-limonene)对人肝癌SMMC—7721细胞的抗肿瘤作用机制,并探讨其对有丝分裂原激活的蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号传导通路上信号传导分子p-ERK及核转录因子c-MYC表达的影响。方法 采用噻唑蓝(methy thiazoly tetrazolium,MTT)法观察d-limonene对人肝癌SMMC—7721细胞增殖的抑制作用,并按下列公式计算抑制率:抑制率=(1—实验组OD值/对照组平均OD值)×100%,再计算出浓度与抑制率相关的回归方程,经检验后再计算IC50值。用免疫组织化学法观察d-limonene对人肝癌SMMC—7721细胞MAPK信号传导通路上信号传导分子p-ERK及核转录因子c-MYC表达的影响,计算其阳性表达率。 结果 d-limonene 对人肝癌SMMC—7721细胞有明显的抑制作用,不同浓度有不同的影响,其影响与剂量有正比关系。在MTT实验中,d-limonene 0.25mmol/L、0.5mmol/L、1mmol/L、2mmol/L、4mmol/L分别处理人肝癌SMMC—7721细胞48 小时后,其抑制率分别为18.2%、34.1%、53.2%、71.8%、92.5%。将浓度进行对数变换后与其抑制率计算出其直线回归方程,经t检验(0.001<p<0.025),故方程呈直线相关,转为曲线方程为Y=100.016X-0.87(Y为d-limonene浓度, X为抑制率),计算得IC50为0.85mmol/L。不同浓度的 d-limonene实验组抑制率与<WP=5>1g/L DMSO对照组比较,其差异均有显著性(p<0.001),各实验组之间抑制率经方差分析,其差异均有显著性(p<0.01)。p-ERK、c-MYC在各组中均有阳性表达,对照组表达最为明显,其p-ERK阳性表达率为37.8%、c-MYC阳性表达率为41.7%,实验组的表达较对照组均要低。p-ERK在d-limonene 0.5mmol/L、1mmol/L实验组的阳性表达与对照组比较,其差异均有显著性(p<0.01), c-MYC在d-limonene 0.5mmol/L、1mmol/L实验组的阳性表达与对照组比较,其差异均有显著性(p<0.01)。p-ERK、c-MYC阳性表达在两实验组之间比较,其差异均有显著性(p<0.05)。在实验组中p-ERK、c-MYC阳性表达率有一定的量效关系,二者还有一致性。结论 右旋柠烯可影响人肝癌SMMC—7721细胞MAPK信号传导通路信号的传导,使信号传导激酶的活化量降低,导致到达细胞核的增殖信号减弱,从而抑制人肝癌SMMC—7721细胞的增殖。