重金属有机结合态与硫化物结合态具有不同的化学特性与毒理特点，这两类物质对重金属元素的迁移、转化和毒性有着各自不同的影响。本文以BCR连续分级提取法为基础，以模拟样品和河流底泥沉积物为研究对象，通过理论计算与对比实验，建立了一种基于生物有效性基础上的重金属形态连续分级提取体系—四级五步连续分级提取法。 在四级五步提取体系中，可还原提取态的提取剂调整为0.1mol／LNH₂OH·HCl（用HNO₃调pH值=3.0），有效避免了原提取条件中提取剂pH值过低而造成的对可氧化提取态重金属元素中有机结合态的提前提取。 本研究选定NaOH溶液与NH₂OH·HCl溶液作为沉积物中有机结合态重金属元素的提取剂，以分离重金属有机结合态与硫化物结合态。通过重金属硫化物的溶解实验和原BCR分级提取法中可氧化提取态后残渣的提取实验确定了提取剂的酸度阈值和碱度阈值。 通过条件实验与对比验证实验，最终确定采用0.01mol／L NaOH溶液与0.1mol／L NH₂OH·HCl（0.02mol／L HCl）溶液分离提取重金属有机结合态与硫化物结合态。 对沉积物标准样GBW07310应用四级五步连续分级提取法，证明了方法本身具有较高的准确度；对五处表层沉积物样品应用此分级提取体系，验证了其能较好的分离提取各种生物有效性不同的重金属形态；可在保证可还原态重金属元素完全提取的前提下，避免对重金属有机结合态的提前提取；在此基础上，这种新的提取体系能较为完整和高选择性的从不同的实际沉积物样品中分离提取重金属有机结合态与硫化物结合态，对不同采样点的沉积物样品具有较好的适应性和可比性。