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目的：本文选取银杏叶提取物为模型药物,通过单因素考察及正交实验制备银杏叶提取物凝胶骨架片,以银杏叶提取物总黄酮醇苷不同时间点累计释放度为评价指标,采用溶出仪进行体外释放度测定；选择抗氧化和扩张血管这两个与模型药物临床应用密切相关的药理指标,采用药理学实验方法,建立药理指标的变化与模型药物浓度良好的线性关系,以选择的生物活性指标对自制凝胶骨架片进行体外释放度测定,研究成分指标与生物活性指标评价体外释放度的相关性,以建立一种符合中药多成分特点又简单快速评价该制剂体外释放特征的手段和方法。方法：(1)以总黄酮醇苷不同时间点累积释放度为指标,采用紫外分光光度法对骨架材料的种类、用量、填充剂的种类、压片硬度、压片方法进行单独考察,并结合f2相似因子法进行相似性判断,以找出对药物释放行为具有显著性影响的因素；采用正交实验,以药物不同时间点累积释放度为考察指标,采用L9(34)正交表进行处方优化,确定亲水凝胶骨架片的最终处方；分别以紫外分光光度法及高效液相色谱法测定总黄酮醇苷及三个主要的黄酮苷元不同时间点累积释放度,比较总黄酮醇苷及三个苷元释放行为的相似性；(2)抗氧化生物活性指标-提取物量效关系的建立：采用DPPH法、ABTS法及FRAP法,分别建立生物活性指标与药物浓度的线性相关关系；扩张血管生物活性指标-提取物量效关系的建立：体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC-T1),建立氯化钴诱导的细胞缺氧损伤模型；随机将细胞分为5组,测定5组细胞上清液中ET-1、NO的水平,建立银杏叶提取物与细胞上清液中NO. ET-1含量变化的相关性；以生物活性指标与药物浓度所建方程的线性相关系数r、呈线性相关时的最低浓度、操作繁简、重复性为考察指标,选择相对合适的测定方法；(3)采用高效液相色谱法对自制凝胶骨架片进行体外释放度测定,同时不同时间点溶出液进行ABTS实验,测定ABTS自由基清除率,以线性回归方程的相关系数r值及f2相似因子法建立银杏叶提取物凝胶骨架片体外释放的成分指标-生物活性指标相关性。结果：(1)选择两种骨架材料混合(A)、混合比例(B)、填充剂用量(C)作为三个因素,因素的三个水平如下：A K4M-K15M混合使用、K4M-K100M混合使用及K15M-K100M混合使用,B 4：1、3：1、2：1,C 5%、7%、10%,各因素对药物释放度的影响顺序为：HPMC混合>填充剂用量>混合比例,因素的各水平优劣顺序为：A：2>3>1,B:2>3>1, C:3>1>2,优化后的最佳组合为A2B2C3。分别采用紫外分光光度法及高效液相色谱法对三批骨架片不同时间点的累积释放度进行测定,计算得f2均>50表明总黄酮醇苷及其三个主要黄酮苷元的释放行为是相似的；(2)三种抗氧化生物活性指标测定方法结果：①以DPPH自由基清除率为纵坐标,药物浓度为横坐标,得到的线性方程相关系数r=0.9993,其浓度范围是200-1200μg.ml-1,达到线性相关关系的最低浓度为200μg.ml-1;②以ABTS自由基清除率为纵坐标,得到的线性方程相关系数r=0.9998,其浓度范围是6.25～100μg.ml-1,达到线性相关关系的最低浓度为200 μg.ml-1;③以还原能力为纵坐标,所得线性方程相关系数r=0.9437,其浓度范围是1.5～50 μg.ml-1,达到线性相关关系的最低浓度为1.5 μg.ml-1;(3)统计结果表明除0.1mM外,氯化钴各浓度组与正常对照组相比,细胞活力均有所降低(P<0.05),且各浓度组之间均有显著性差异(P<0.05),实验过程中选择浓度为1 mM。单纯缺氧组细胞上清液中NO含量明显降低(P<0.05),ET-1含量明显升高(P<0.05),提示离体模型成立；银杏叶提取物不同浓度组与正常细胞组相比,NO分泌量具有显著性差异(P<0.05),除GBE浓度为3.125 μg. ml-1时,提取物各浓度组与损伤组相比,均具有显著性差异(P<0.05)；银杏叶提取物各浓度组与损伤组和正常组相比均具有显著性差异(P<0.05)；银杏叶提取物可显著干扰细胞损伤模型NO、ET-1的释放,且干扰作用与银杏叶提取物浓度呈一定的线性相关,将银杏叶提取物的浓度与对应的加样后细胞上清液NO、ET-1含量做相关性分析,得到药物浓度的对数与给药后细胞上清液中NO、ET-1含量相关系系数分别为r--0.9759和r=0.9379,结合抗氧化生物活性测定方法所得方程的相关系数、可重复性、成线性的最低浓度、精密度等,最终选择抗氧化这一生物活性指标,选择的测定方法为ABTS法；(4)以银杏叶提取物缓释片体外溶出液ABTS清除率为因变量Y,药物累积释放度为自变量X,建立回归方程,其相关系数r=0.998,结果表明二者相关性良好；将生物效应的清除率表征为药物累积释放百分率,采用f2相似因子法比较生物指标与化学指标测得骨架片累计释放度的相似性,计算得f2=66.40>50,表明生物指标与化学指标测得药物累计释放百分率是相似的,这表明ABTS自由基清除率实验方法可以作为一种既符合中药多成分特点又简单快速评价该制剂体外释放特征的手段和方法。结论：实验表明,自制银杏叶提取物凝胶骨架片经紫外分光光度法及高效液相色谱法测定后,其体外释药行为基本符合缓释制剂特征,ABTS自由基清除率实验方法可以作为一种既符合中药多成分特点又简单快速评价该制剂体外释放特征的手段和方法。