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微管是真核细胞中重要的细胞骨架之一。在真核细胞中,微管发挥了许多重要的功能,包括细胞形状的维持,细胞内物质运输,细胞分裂,细胞极化和细胞运动等。微管是高度动态的聚合体,这种动态性对其很多功能的发挥至关重要。微管结合蛋白是一类能够与微管相互作用的蛋白质。通过调节微管的组装和稳定性,微管结合蛋白在许多微管相关的细胞生物学功能中发挥了重要的作用。微管结合蛋白的异常表达或错误修饰可能会导致微管紊乱并导致疾病的发生,如癌症和神经退行性疾病等。Mdp3(基因位于Xq26.3)是最近在以质谱为基础的蛋白质组学中鉴定出的一个新的潜在的微管结合蛋白。目前,Mdp3的细胞内定位和功能上的重要性还不清楚。在本研究中发现Mdp3是一个微管结合蛋白,在细胞中定位于微管或是微管组织中心——中心体上。通过GST-pulldown实验证明Mdp3能够在细胞内和体外与微管蛋白和γ-微管蛋白相互作用。免疫荧光显微分析和微管共沉淀实验结果显示Mdp3还能够在细胞内和体外与微管相互作用。细胞内Mdp3表达下调能够明显延缓微管再生,暗示Mdp3能够促进细胞内微管的组装。通过微管浑浊度实验及荧光分析微管体外聚合实验进一步证实,Mdp3还能够在体外纯化体系中促进微管的组装。实验结果显示Mdp3能够在细胞内和体外显著增强微管的稳定性。另外,Mdp3在细胞周期中表达量存在差异暗示了Mdp3很可能参与了细胞G2/M期转变过程中微管动态性的精确调节。除此之外,Mdp3在不同组织中表达水平也存在差异,暗示了Mdp3可能在生物组织发育中发挥了重要作用。上述结果表明Mdp3是一个新的微管结合蛋白,能够促进微管组装和稳定。Mdp3编码一个由876个氨基酸组成的蛋白质。序列分析显示,Mdp3的N端含有两个卷曲螺旋结构域,中间含有一个MAP7结构域。本研究发现Mdp3是通过含有两个卷曲螺旋结构的N末端与微管蛋白和微管相互作用,并发挥稳定微管的功能。本研究构建了Mdp3连续缺失突变质粒,通过pulldown实验和免疫荧光显微分析等方法证实,Mdp3的两个卷曲螺旋结构对其与微管和微管蛋白的相互作用至关重要。总而言之,本研究首次证实Mdp3是一个新的微管结合蛋白,并能够定位在中心体上。Mdp3通过它的卷曲螺旋结构与微管和微管蛋白相互作用。研究进一步发现,Mdp3能够在细胞内和体外促进微管聚合,稳定微管。Mdp3在细胞周期不同阶段和不同组织中表达水平存在差异。