目的：检测E3连接酶Hrd1对核心钟蛋白BMAL1降解的调控，进而在此基础上探究细胞内固有节律的变化。　　方法：分别在小鼠神经元细胞系(N2a)细胞系及人胚肾细胞系HEK293中过表达或干扰Hrd1基因的表达，进而通过免疫印迹方法检测细胞内BMAL1蛋白水平的变化；在HEK293细胞内过表达Hrd1后，用蛋白合成抑制剂CHX处理细胞，进而分别在0h、2h、4h、8h四个不同的时间点收集细胞并通过免疫印迹的方式检测BMAL1的半衰期是否发生改变；为了探究Hrd1究竟是通过怎样的方式影响了BMAL1的蛋白水平，在 N2a细胞系或 HEK293细胞系内共转 FLAG-Hrd1及GFP-N3-BMAL1，在转染48 h后用蛋白酶体抑制剂MG132处理细胞，12 h后收集细胞并进行免疫共沉淀实验，通过免疫印迹方法检测Hrd1与BMAL1之间是否存在结合，以及在Hrd1的影响下，BMAL1的泛素化水平是否发生改变；进一步的，在HEK293细胞系中分别共转FLAG-Hrd1、GFP-BMAL1及HA-Ub(WT)、HA-Ub(K48R)或HA-Ub(K63)，在转染48 h后用蛋白酶体抑制剂MG132处理细胞，12h后收集细胞并进行免疫共沉淀实验，通过免疫印迹的方法寻找在Hrd1的影响，BMAL1蛋白通过泛素化降解的位点；为了检测BMAL1蛋白水平的变化是否对下游受其调控的基因产生了影响，在N2a细胞系内过表达Hrd1，24h后收集细胞，使用实时荧光定量PCR(q-PCR)方法检测受BMAL1调控的Per1、Dbp等基因的mRNA水平的改变；在N2a细胞系内过表达Hrd1，24 h后含有马血清的培养基处理细胞，使细胞时钟节律同步化，进而每隔4h收集一组细胞，共收集了8组样品（含有一个完整的振荡周期），通过q-PCR的方式检测在Hrd1的影响下，细胞内的时钟节律是否发生改变。　　结果：与对照组相比，过表达Hrd1后BMAL1的蛋白水平明显下调，而在敲减了Hrd1后，BMAL1蛋白上调；在CHX取点实验中，过表达Hrd1的实验组，BMAL1的降解速率明显快于对照组的情况；免疫共沉淀实验表明，无论是外源性还是内源性的结果，Hrd1均可与BMAL1被共沉淀下来，此外，免疫印迹的结果显示，过表达Hrd1后，BMAL1的泛素化水平明显提高；在共转了GFP-N3-BMAL1及HA-Ub(K48R)的体系内，无论是对照组还是实验组，BMAL1的泛素化水平明显下调且两者无显著差别，而在共转了GFP-N3-BMAL1与HA-Ub(WT)或HA-Ub(K63R)的体系中，与对照组相比，过表达Hrd1后BMAL1的蛋白水平均明显上调；同对照组相比，过表达Hrd1以后 Per1，Dbp的mRNA水平均明显下调，BMAL1的mRNA水平则无明显差异；而在用马血清处理使细胞同步化的试验中，同对照组相比，过表达Hrd1后，Per1基因在整个振荡周期各个时间点的振幅都明显减弱，振荡周期也有所延伸。　　结论：E3连接酶Hrd1可以将核心钟蛋白作为其特异性底物与之结合，进而通过促进其泛素化水平的方式使之通过泛素-蛋白酶体系统被降解，并通过对BMAL1蛋白降解的调控来影响细胞内时钟节律地震荡过程。