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冠状动脉硬化性心脏病指冠状动脉粥样硬化使血管阻塞,导致心肌缺血,缺氧而引起的心脏病,它和冠状动脉功能性改变统称冠状动脉性心脏病,简称冠心病,亦称缺血性心脏病。冠状动脉硬化性心脏病是动脉粥样硬化导致器官的最常见类型。许多疾病的产生多是由于细胞异常凋亡引起,如肿瘤、神经系统、自身免疫及心血管系统等。就心血管系统疾病而言,体外及临床性研究证实:细胞异常凋亡与动脉粥样硬化、高血压、心肌病、心律失常及心力衰竭等疾病的发生均有关。随着心血管分子生物学研究发展,冠心病新的独立危险因素:同型半胱氨酸(Homocysteine,HCY)血症,受到更多关注。大量实验证明内皮细胞可经同型半胱氨酸诱导后产生凋亡,进而促进动脉粥样硬化的发生发展,其机制的研究已逐渐明确。
中药红景天属景天科红景天属,实验研究及观察表明:红景天对心脑血管疾病有显著疗效,可预防和治疗心脑血管疾病、更年期综合症及由此引发的不稳定性心绞痛、心前区闷痛,心悸、气短症状。红景天苷及其苷元酪醇、酪萨维、红景天素等是其有效药理活性成分。
相关研究实验证明同型半胱氨酸可诱导内皮细胞凋亡,导致动脉粥样硬化的进展,红景天苷是被证明了的对心脑血管疾病的预防和治疗有着显著疗效。本实验的重点是讨论红景天苷作用于同型半胱氨酸诱导内皮细胞凋亡后的影响,这不仅为研究动脉粥样硬化的发病机制提供了线索,而且对动脉粥样硬化的预防和治疗也具有一定的指导意义,为中西医结合治疗心血管疾病用药方面提供新思路、新理念。
目的:红景天苷对同型半胱氨酸诱导内皮细胞凋亡的抑制作用。
方法:
1.以体外内皮细胞系为实验对象,37℃的环境下培养,建立凋亡细胞模型,应用倒置显微镜、MTT方法观察不同浓度同型半胱氨酸诱导的HUVEC形态、生存活力的影响;应用流式细胞分析仪(FCM)检测HUVEC凋亡的影响;应用Western blot检测同型半胱氨酸对细胞凋亡相关蛋白Caspase-3、Bax及Bcl-2在HUVEC细胞中的表达;
2.以体外内皮细胞系为实验对象,37℃的环境下培养,建立红景天苷干预细胞凋亡模型,应用倒置显微镜、MTT方法观察经红景天苷对同型半胱氨酸诱导的HUVEC形态、生存活力的影响;应用流式细胞分析仪(FCM)检测红景天苷对同型半胱氨酸诱导HUVEC凋亡的影响;应用Western blot检测红景天苷对同型半胱氨酸诱导细胞凋亡相关蛋白Caspase-3、Bax及Bcl-2表达的影响。
结果:
1.同型半胱氨酸可导致HUVEC细胞贴壁能力减弱,细胞形态变圆,体积缩小,这一效应具有剂量依赖性。
2.同型半胱氨酸能够显著抑制HUVEC细胞的活力。
3.同型半胱氨酸能够显著诱导HUVEC细胞发生G1期阻滞和凋亡。
4.同型半胱氨酸作用于HUVEC细胞后caspase-3的表达水平升高,抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平降低,促凋亡蛋白Bax的表达水平增高。
5.联合应用红景天苷可以抑制同型半胱氨酸的毒性效应。
结论:我们的研究结果表明红景天苷能够抑制同型半胱氨酸诱导的内皮细胞凋亡,其机制可能是通过红景天苷的抗氧化应激作用形成的,这提示红景天苷可能用于临床上对高同型半胱氨酸血症的预防治疗。