牛奶是奶牛从乳腺分泌出来的一种白色不透明的液体，由于牛奶营养丰富，逐渐成为了人们的日常饮品，尤其对于婴幼儿，成为了代替母乳的产品。在奶牛养殖过程中，奶牛会因为各种各样的原因患病，在治疗这些疾病时，抗生素成为了养殖户的首选药物，但是在治疗奶牛疾病时，有时会超量使用抗生素，这就会引起牛奶中抗生素的残留。如果乳中含有微量的抗生素，经常食用，可能会导致人体内致病菌产生耐药性，甚至有的人对部分抗生素产生过敏现象，导致死亡，所以建立高效的抗生素检测方法是乳品行业工作者的一项重要任务。本研究根据农场治疗奶牛乳房炎所使用的用药方式、用药种类和用药时间，对患有乳房炎的奶牛进行治疗，并收集其奶样，检测样品中抗生素浓度的变化。建立高效液相色谱以及超高效液相色谱串联质谱检测乳中抗生素含量的方法，优化实验条件并利用药物代谢动力学研究牛奶中抗生素的代谢情况，最后得出奶牛的休药期。乳中庆大霉素和脱呋喃甲酰基头孢噻呋为研究对象，建立有效的提取方法，优化衍生条件。主要包括衍生时间，缓冲液浓度及PH值进行优化，最终得出最优的衍生条件。结果表明：衍生30min，缓冲液浓度0.4mol/L，pH值12为最优的衍生条件。本研究根据外标法进行定量，庆大霉素和脱呋喃甲酰基头孢噻呋检出限分别为1.5μg/mL和0.45ng/mL。进一步进行回收率试验、精密度试验和稳定性试验。结果表明：庆大霉素的回收率在88.8%-93.2%之间，脱呋喃甲酰基头孢噻呋的回收率在98.6%-102.2%之间，精密度满足实验要求，两种抗生素在-20℃下，30天内稳定性良好。应用药物代谢动力学分析牛奶中庆大霉素和脱呋喃甲酰基头孢噻呋的代谢情况，主要包括庆大霉素在肌肉注射情况下牛奶中药物代谢情况，及头孢噻呋在乳房灌注、肌肉注射和静脉滴注情况下牛奶中抗生素代谢情况。我最后利用药物代谢动力学软件进行数据分析模拟，利用非房室模型法分析了药物代谢动力学参数。结果表明：肌肉注射庆大霉素钠盐的奶牛休药期是144h、肌肉注射头孢噻呋钠盐的奶牛休药期是56h、静脉滴注头孢噻呋的奶牛休药期为24h、乳房灌注头孢噻呋钠盐的奶牛休药期是64h；同一种药物，不同用药方式会影响奶牛的休药期，静脉滴注比肌肉注射的休药期短；不同药物的休药期有较大差异，庆大霉素的休药期比头孢噻呋的休药期长很多，推荐头孢噻呋为常用药物。