PQE32-HPV18L1基因重组株构建、蛋白表达及鉴定

来源 :哈尔滨医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ade4444
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目的:构建重组原核表达质粒获得HPV18L1活性蛋白,为进一步研制HPV18基因工程疫苗打下基础.方法:以重组质粒pBR322-HPV18为模板,利用PCR方法扩增HPV18L1DNA片段,将HPV18L1DNA与pUC19质粒重组构建pUC19-HPV18L1重组质粒.经酶切、琼脂糖凝胶电泳验证重组结果的正确性;并通过测序检查质粒重组后序列有无变化.再利用pQE32质粒做表达载体构建pQE32-HPV18L1重组质粒,又经酶切、琼脂糖凝胶电泳验证其正确性;将重组的pQE32-HPV18L1转入工程菌M15(pREP4),经IPTG诱导后,表达特异的HPV18L1蛋白,通过Western blot对表达产物进行鉴定.结论:该实验完成pQE32-HPV18L1基因重组株构建,蛋白表达及鉴定.
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