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目的:探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)静脉注射移植对大鼠脑梗死后神经功能恢复及对神经再生抑制因子Nogo-A表达的影响。
方法:雄性SD大鼠102只,随机分成假手术组(Sham组)、损伤对照组(MCAO组)、溶剂对照组(Vehicle组)和移植组(BMSCs组),各组按时间点再分为3天、7天、14天和21天组,移植组3天组12只,6只用于取材,6只用于观察BMSCs分布,其余各组6只。采用全骨髓贴壁法分离培养大鼠BMSCs,线栓法制作大鼠MCAO模型,3天组部分BMSCs移植前用羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记,取材后在荧光显微镜下观察BMSCs在脑组织内的分布。在缺血2h再灌注24h后,移植组于自大鼠尾静脉注射BMSCs悬液1ml(3×106个BMSCs),Vehicle组则注射0.01mol/L的磷酸盐缓冲液(PBS)1ml。造模成功后第3天、第7天、第14天和第21天通过进行神经功能缺损程度评分,观察其恢复状况,RT-PCR法检测Nogo-AmRNA的表达,免疫组织化学染色方法检测Nogo-A蛋白的表达水平。
结果:在BMSCs移植组3天组损伤周边区脑组织中可观察到CFSE染色的阳性细胞;BMSCs组术后第7、14和21天神经功能恢复优于MCAO组和Vehicle组;BMSCs移植组术后第3、14和21天脑组织损伤区周边组织中Nogo-AmRNA表达和Nogo-A蛋白的表达较MCAO组和Vehicle组降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。
结论:BMSCs移植可促进大鼠脑梗死后的神经功能恢复,其作用机制与下调Nogo-A的表达有关。