脑出血后血肿周围脑组织自噬现象与中风闭脱证相关性研究

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目的:本课题通过透射电镜技术对脑出血患者血肿周围脑组织神经细胞内自噬泡数量的观察,研究细胞自噬与中医出血中风闭脱证及出血量、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、格拉斯哥昏迷评分(Glasgow评分,GCS)的关系,从而探讨细胞自噬在脑出血后继发性损伤中的作用及可能存在的机制,同时为中医微观辨证提供分子细胞生物学水平的证据。资料与方法:临床所选病例既符合脑出血诊断要点,属基底节区出血、出血量大于30ml(参考脑出血手术指征),又根据中医辨证为阴闭、阳闭、脱证3种证型,共收集手术病例24例,其中男性16例,女性8例,平均年龄58岁(45-76岁)。根据中医辨证,阳闭证12例(男性8例,女性4例),平均年龄53岁(45-66岁);阴闭证8例(男性6例,女性2例),平均年龄64岁(57-76岁);脱证4例(男性2例,女性2例),平均年龄62岁(50-76岁);脑出血组标本来自血肿清除术中吸引器所吸取的脑组织碎片。另外设正常对照组6例。根据“多田公式”计算出血量,并进行NIHSS、GCS评分。两组标本制作严格按照电镜标本制作方法制作,利用透射电子显微镜(transmission electron microscopy, TEM简称透射电镜)观察各组脑组织细胞内的自噬泡数量。结果:1.脑出血患者血肿周围脑组织神经细胞内自噬泡数量高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。2.脑出血患者中医阳闭、阴闭、脱证三组之间血肿周围脑组织神经细胞内自噬泡数量有差异,差异有统计学意义(P<0.01)。按自噬泡数量多少顺序排列为:脱证>阴闭证>阳闭证。3.脑出血患者血肿周围脑组织神经细胞内自噬泡数量与出血量呈正相关,相关性有统计学意义(P<0.01)。4.脑出血患者血肿周围脑组织神经细胞内自噬泡数量与NIHSS评分呈正相关,与GCS评分呈负相关,相关性有统计学意义(P<0.01)。5.脑出血患者中医阳闭、阴闭、脱证组三组之间出血量、NIHSS评分及GCS评分有统计学差异(P<0.01)。各型按出血量及NIHSS评分顺序排列为:脱证>阴闭证>阳闭证;各型按GCS评分排列则为:脱证<阴闭证<阳闭证。结论:1.透射电镜显示正常对照组神经细胞内仅有少量的自噬体、溶酶体,而脑出血患者血肿周围脑组织自噬溶酶体途径被激活,表现为神经细胞内自噬泡的数量增多。2.脑出血后能够诱导自噬,血肿周围脑组织神经细胞内自噬泡数量与出血量、NIHSS评分呈正相关,与GCS评分呈负相关,推测细胞自噬参与了脑出血后继发性神经细胞损伤。3.脑出血后血肿周围脑组织神经细胞内自噬的表达情况对中医出血中风闭脱证微观辨证有一定的帮助。结合出血量及NIHSS、GCS评分有助于出血中风闭脱证诊断。
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