【摘 要】
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本文通过对实验室保存的39株苏云金芽孢杆菌分离株的生物活性测定,筛选出对桔小实蝇高毒力的菌株YJ-82并对该菌株进行分子特性的研究,结果如下:1苏云金芽孢杆菌分离株对桔小
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本文通过对实验室保存的39株苏云金芽孢杆菌分离株的生物活性测定,筛选出对桔小实蝇高毒力的菌株YJ-82并对该菌株进行分子特性的研究,结果如下:1苏云金芽孢杆菌分离株对桔小实蝇毒力测定在39株苏云金芽孢杆菌分离株对桔小实蝇幼虫的室内生物测定中,发现有7株菌株(HZ-7、HZ-104、XM-98、YJ-82、HZ-74、XF-71、HZ-94)具有较高的生物活性,药后5天对桔小实蝇的校正死亡率达到70.00%以上,其中YJ-82菌株的校正死亡率达88.00%,高于其它分离株。2 YJ-82菌株分子特性研究进一步考察了7株分离株对双翅目害虫桔小实蝇幼虫的生物活性,明确了苏云金芽孢杆菌不同菌株的生物活性之间存在很大差异,并对筛选的YJ-82菌株进行了一系列的基因及杀虫蛋白特性的研究。以crylAa,crylAb,crylAc,crylAe,cry1B,cry1C,cry1D,cry1E cry1F,cry1G cry2,cry4A,cry4B,cry4C,cry4D等16对特异性引物进行PCR分析。结果表明YJ-82菌株不但含有丰富的cry1类基因,同时还含有cry2和cry4类基因。菌株PCR产物测序结果的同源性分析表明YJ-82菌株的cry2基因与cry2Ab(GenBank:M23724)的同源性为99%,可以推测出YJ-82含有cry2Ab基因,这与PCR-PFLP分析结果是一致的。cry4类基因与cry40-like和ORF2基因(Genbank:AB112346)同源性达89%;而与cry4A的同源性较低,在77%左右。初步可以推测该菌株含有cry40-like和ORF2基因,而非cry4类基因。SDS-PAGE分析表明YJ-82菌株编码130 kDa、65kDa、27kDa三条蛋白带,与基因型测定结果是一致的。
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