目的:本课题基于痛风性关节炎（GA）本实验室前期研究的基础之上,选取乳酸、氨基酸等进行药效学研究,进而引入在炎性反应中发挥作用的TLRs受体和相关通路TLR2/4-NF-κB,进行穿山龙总皂苷的干预研究。以期阐明穿山龙总皂苷治疗GA的机制,为开发出安全有效且机理明确的治疗GA的单味中药提供依据。方法:1.连续5天膝关节注射MSU诱导痛风性关节炎大鼠模型,将其分为正常组、模型组、穿山龙总皂苷高、中、低剂量组和阳性药秋水仙碱组。将上述各组大鼠于第7天造模两小时后,通过腹主动脉进行采血,通过紫外分光光度法考察血清中尿酸、肌酐和乳酸的水平;通过高效液相色谱法检测血清中甘氨酸及色氨酸的水平。2.将上述各组大鼠于第5天使用大鼠代谢笼收集24小时尿液,通过紫外分光光度法考察尿液中尿酸和肌酐的水平;通过高效液相色谱法检测血清中鸟苷的水平。3.将上述各组大鼠于第7天造模两小时后,通过腹主动脉进行采血,于膝关节正中纵行切开取出滑膜组织,以酶连免疫吸附检测技术检测血清中 TNF-α、IL-6 和 IL-1β含量。通过 Realtime PCR 和 Western Blot 法检测大鼠滑膜组织中 TLR2、TLR4、TRAF6、IKKα、IκBα和 NF-κB 的 mRNA及蛋白表达水平;结果:1.穿山龙总皂苷高、中、低剂量均可显著降低痛风性关节炎大鼠血清尿酸、肌酐和乳酸的含量;高、中剂量的穿山龙总皂苷均可显著升高甘氨酸和色氨酸的含量,低剂量的穿山龙总皂苷对降低的甘氨酸和色氨酸无回调作用。2.与模型组大鼠相比,穿山龙总皂苷高、中剂量对痛风性关节炎大鼠尿液中鸟苷、尿酸和肌酐的含量均显著升高,低剂量的穿山龙总皂苷对尿液中鸟苷、尿酸和肌酐的含量没有显著影响。3.与模型组大鼠相比,穿山龙总皂苷高剂量对痛风性关节炎大鼠血清中的IL-6和IL-1β的含量均显著下降,其他剂量组无显著性作用;穿山龙总皂苷高、中剂量组大鼠TNF-α含量均显著下降,低剂量无显著性作用。4.与模型组大鼠相比,高、中、低剂量的穿山龙总皂苷可显著降低痛风性关节炎大鼠TLR4、TRAF6、IκBα、IKKα的mRNA水平及蛋白的表达量;高、中、低剂量的穿山龙总皂苷可显著降低TLR2的mRNA表达水平,但只有低剂量的穿山龙总皂苷对TLR2的蛋白表达有显著降低作用;高、中、低剂量的穿山龙总皂苷可以显著降低NF-κB的mRNA水平,而与模型组相比只有高剂量能降低NF-κB蛋白的表达。结论:1.穿山龙总皂苷可能通过改善肾功能促进尿酸和肌酐的排泄,影响尿液和血清中两者的含量,发挥对痛风性关节炎的治疗作用;通过调控乳酸、甘氨酸和色氨酸的表达量,影响炎性反应的发生发展,有利于痛风的控制。2.穿山龙总皂苷能够降低痛风性关节炎大鼠关节滑膜中TLR2、TLR4、TRAF6、IκBα、IKKα和NF-κB的mRNA及蛋白表达量;对炎性因子TNF-α、IL-6和IL-1β的表达量也有显著降低的作用,提示穿山龙总皂苷对TLR2/4-NF-κB信号通路有抑制作用,通过对这一通路的调控实现对炎性反应的抑制。