[目的]通过临床资料统计与实验研究相结合的方法,揭示邻苯二甲酸酯(PAEs)与稽留流产的关系,并初步探讨其发病机制。[方法](1)通过病例-对照回顾性研究,收集1993年-2012年我院稽留流产病例,共计1945例,对比1874例妊娠20周内的单胎活孕妊娠者的病例资料。通过卡方检验和logistic回归分析,分析与稽留流产发病相关的高危因素,探讨环境等因素在稽留流产中可能的影响。(2)研究稽留流产病人中邻苯二甲酸酯(PAEs)的暴露情况：留取原因不明的稽留流产病人及正常妊娠者各150份同期尿液标本。采用超高效液相色谱-质谱法分别检测尿液中13种邻苯二甲酸酯代谢产物水平,研究稽留流产病人的邻苯二甲酸酯(PAEs)暴露情况。(3)体外试验：观察人滋养层细胞系(HTR-8)在不同浓度DEHP (PAEs最常见的一种)作用下细胞活力、凋亡及细胞周期变化情况,初步探讨其凋亡相关机制。[结果](1)本案logistic回归多因素分析筛选出5个独立危险因素,将其按OR值由大至小进行排列如下：乙型肝炎病毒携带者(OR 8.126,CI4.688-14.084),贫血(OR 5.498,CI 2.243-13.473),初产妇(OR 2.305,CI 2.013-2.638),自然流产史(OR 2.359,CI 1.703-3.268),室外职业者(OR1.777,CI 1.538-2.052)。研究近年来稽留流产独立因素构成变化显示：室外职业及环境污染构成比升高(P<0.05)与稽留流产发病数增加有关；而流产≥3次、自然流产病史、贫血和乙肝病毒携带者的构成比变化与稽留流产无明显相关(P>0.05)；同样,初产妇这一稽留流产危险因素,占比呈明显下降与稽留流产发病数升高不符合。(2)超高效液相色谱-质谱法检测结果：DEHP的三种代谢产物(MEHP、MEHHP、MEOHP)及DMP代谢产物MMP在病例组尿液中检出水平显著高于对照组(P<0.05)。而DEP的代谢产物MEP在病例组尿液中检出水平却显著低于对照组(P<0.05)。在相关性分析中,MEHP与雌激素中度相关,而MMP与孕激素中度相关。(3)体外研究发现：①DEHP≤20ng/ml作用于HTR-8细胞48h未发现明显毒性作用；DEHP 15ng/ml作用24小时能抑制HTR-8细胞的凋亡,同时明显延长细胞S期,减少GO/Gl期阻滞。DEHP 15ng/ml作用HTR-8细胞系6小时,发现Bax表达降低而Bcl-2表达上升,可能是小剂量DEHP抑制细胞凋亡的机制。②DEHP≥30ng/ml作用HTR-8细胞24到48小时,HTR-8细胞活性明显受抑制(P<0.05); 30ng/ml的DEHP能促进HTR-8细胞凋亡,同时显著性缩短细胞S期,增加GO/G1期阻滞。[结论](1)室外职业者、初产妇、自然流产病史、贫血和乙肝病毒携带者可能是稽留流产发生的独立危险因素,其中仅有室外职业者及未知因素的构成比随稽留流产发病数增加而升高。初步推论生育史、合并症不能解释稽留流产发病数的升高,而环境污染等不明原因可能是稽留流产病例数升高的重要原因之一。(2)稽留流产病人部分邻苯二甲酸酯暴露情况明显高于对照组,表明环境污染物-邻苯二甲酸酯与近年来稽留流产高发病数有关。(3) DEHP 15ng/ml对人早孕滋养细胞毒性不明显,并能抑制其凋亡,促进生长。其原因可能与小剂量的DEHP能下调Bax表达,上调Bcl-2的表达有关,是稽留流产发生的机制之一。